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《2017中国中西医结合麻醉学会[CSIA]年会暨第四届全国中西医结合麻醉学术研讨会暨陕西省中西医结合学会麻醉专业委员会成立大会论文资料汇编》2017年
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PKC-α/HO-1信号通路在内毒素诱发大鼠肺泡巨噬细胞损伤中的作用

李香云  王曼  余剑波  吴丽丽  王丹  史佳  
【摘要】:目的评价蛋白激酶C-α(PKC-α)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路在内毒素诱发大鼠肺泡巨噬细胞损伤中的作用。方法将体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞以1×10~4个/ml密度接种于96孔板中。采用随机数字表法分为5组(n=5):对照组(C组)、内毒素攻击模型组(L组)、内毒素+PKC-α抑制剂Go6976组(LG组)、内毒素+PKC-α激动剂PMA(LP组)和内毒素+溶媒二甲基亚砜组(LD组)。采用给予10μg/ml LPS刺激NR8383细胞的方法制备肺泡巨噬细胞内毒素攻击模型。LG组、LP组和LD组于LPS刺激前30min分别给予5μM Go6976、100nMPMA、0.1%v/v DMSO预处理30min,再给予10μg/ml LPS,各组均孵育24h后收集细胞,检测丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用Western blot及q-PCR法检测PKC-α、HO-1和Mfn1的表达。结果与C组比较,L组、LG组、LP组和LD组MDA、ROS增高,SOD活性下降,PKC-α、HO-1蛋白及其mRNA表达上调,Mfn1蛋白及其mRNA表达下调(P0.05);与L组比较,LG组MDA、ROS增高,SOD活性下降,PKC-α、HO-1、Mfn1蛋白及其mRNA表达下调,LP组MDA、ROS降低,SOD活性增加,PKC-α、HO-1、Mfn1蛋白及其mRNA表达上调(P0.05),LD组各项指标差异无统计学意义(P0.05)。结论 PKC-α./HO-1信号通路激活后可以减轻大鼠肺泡巨噬细胞内毒素攻击模型的氧化应激损伤,其机制与上调Mfn1表达有关。PKC-α/HO-1信号通路的激活是内毒素诱发大鼠肺泡巨噬细胞损伤时的内源性保护机制。
【作者单位】:天津医科大学南开临床学院天津市南开医院麻醉科
【基金】:国家自然科学基金(81372096) 天津市卫计委基金项目(2014KZ048)~~
【分类号】:R563.8
【正文快照】:
内毒素急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是临床常见的急危重症,具有较高的发病率和死亡率。线粒体融合蛋白-1(Mfol)是线粒体外膜融合相关的蛋白之一,其表达增加可以改善线粒体融合,减轻内毒素急性肺损伤[1_3]。血红素加氧酶-1(HO-1)作为机体内源性的一种应激蛋白,其表达上调

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