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《2017中国中西医结合麻醉学会[CSIA]年会暨第四届全国中西医结合麻醉学术研讨会暨陕西省中西医结合学会麻醉专业委员会成立大会论文资料汇编》2017年
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PKCα通路介导HO-1表达在LPS攻击鼠肺泡上皮细胞中线粒体融合的作用

赵晏民  史佳  余剑波  张圆  宫丽荣  董树安  
【摘要】:目的探讨蛋白激酶Cα(PKCα)通路介导血红素氧合酶-1(HO-1)表达在内毒素(LPS)攻击鼠肺泡上皮细胞中线粒体融合的作用。方法将体外培养的大鼠肺泡上皮细胞以1×10~4个/mL密度接种于96孔培养板,培养24h后,采用随机数字表法分为7组(n=10):空白对照组(C组)、内毒素(LPS)攻击模型组(L组)、模型组+Go6976(PKCα抑制剂)组(LG组)、模型组+佛波酯(PMA,PKC激动剂)组(LP组)、模型组+溶媒二甲基亚砜(DMSO)组(LD组)、6o6976组(G组)和PMA组(P组)。LG组加入Go6976 5μmol/L,LP组加入PMA 100nmol/L,LD组加入等量的0.1%DMSO,预处理30min后,L组、LG组、LP组和LD组分别加入LPS 10μg/mL制备内毒素攻击模型,G组加入Go6976 5μmol/L,P组加入PMA 100nmol/L,C组加入等量PBS作为对照;各组均孵育24h后,采用MTT法测定细胞活力,流式细胞仪测定细胞凋亡率和线粒体膜电位,ATP酶含量试剂盒测定细胞内ATP含量,采用RT-PCR及Western blot方法测定细胞中PKCα、HO-1和线粒体融合相关蛋白[线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)和视神经萎缩蛋白1(OPA1)]的表达水平。结果与C组比较,L组、LG组、LP组和LD组细胞活力下降,细胞凋亡率增高,线粒体膜电位和ATP含量下降,PKCα、H0-1及其mRNA的表达上调,线粒体融合蛋白Mfn1、Mfn2和OPA1及其mRNA的表达下调(P0.05),G组和P组各项指标表达差异无统计学意义(P0.05);与L组比较,LG组细胞活力下降,细胞凋亡率增高,线粒体膜电位和ATP含量下降,PKCα、HO-1、Mfn1、Mfn2和OPA1及其mRNA的表达下调(PO.05);与L组比较,LP组细胞活力增加,细胞凋亡率降低,线粒体膜电位和ATP含量增加,PKCα、HO-1、Mfn1、Mfn2和OPA1及其mRNA的表达上调(P0.05);与L组H比较,LD组各项指标表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 PKCα恿路介导的HO-1在LPS攻击鼠肺泡上皮细胞中具有保护作用,这可能与线粒体融合增多有关。
【作者单位】:天津医科大学南开临床学院天津市南开医院麻醉科
【分类号】:R363
【正文快照】:
PKCα通路介导HO-1表达在LPS攻击鼠肺泡上皮细胞中线粒体融合的作用@赵晏民$天津医科大学南开临床学院天津市南开医院麻醉科 @史佳$天津医科大学南开临床学院天津市南开医院麻醉科 @余剑波$天津医科大学南开临床学院天津市南开医院麻醉科 @张圆$天津医科大学南开临床学

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