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《2016全国中西医结合妇产科研究进展学术研讨会暨2016年第一届江浙沪中西医结合妇产科高峰论坛论文及摘要集》2016年
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四种药物致卵巢早衰小鼠模型的构建及比较

刘益枫  张丹  
【摘要】:背景:卵巢早衰是妇科内分泌的一种常见疾病,指在40岁之前因各种原因所致卵巢功能衰竭和闭经,可伴有骨质疏松、潮热多汗、性欲低下等低雌激素症状,并可导致不孕,严重影响女性生殖健康和生活质量。目前对于卵巢早衰尚无有效的预防、预测、纠正或治疗手段,究其原因,卵巢早衰病因的复杂性以及缺乏统一普适的动物模型是限制卵巢早衰研究进展的两个关键因素。目的:通过构建不同药物(雷公藤多苷/顺铂/阿霉素/环磷酰胺)致卵巢早衰的小鼠动物模型,探究四种药物致卵巢早衰模型的有效性,并比较四种模型的卵巢早衰异同点,以期寻找到卵巢早衰的关键信号分子。方法:将6~8周龄雌性小鼠随机分为5组。雷公藤多苷组皮下注射雷公藤多苷50mg/kg,每天1次,连续注射35天;顺铂组腹腔内注射顺铂2mg/kg,每天1次,连续注射14天;阿霉素组腹腔内注射阿霉素20mg/kg,单次注射;环磷酰胺组腹腔内注射75mg/kg,每周1次,连续4周;对照组腹腔注射磷酸缓冲盐溶液(PBS)。给药完成后,取各组小鼠卵巢组织做石蜡包埋/HE染色,并提取各组卵巢组织RNA,逆转录为cDNA后行Q-PCR检测BMP15、FMR1、FIGLA、FSHR、INHA、POF1B、FOXL2、GDF9、AMH、Wnt4、KIT、KITI、PTEN等既往曾报道的与卵巢早衰相关的因子的表达量改变。结果:上述造模方法所获五组卵巢的大体对比和HE染色切片显示,顺铂和阿霉素用药组的卵巢体积显著缩小,卵泡明显耗竭;环磷酰胺和雷公藤组卵巢体积和卵泡数目较对照组有所减小,但差异尚不显著。顺铂组卵巢较对照组,FMR1、FOXL2、FSHR、INHA、AMH、Wnt4、PTEN、KITL基因的表达显著降低,FIGLA、POF1B、KIT的表达显著增高,差异有统计学意义;阿霉素组卵巢BMP15、FMR1、FOXL2、FSHR、GDF9、AMH、PTEN、KITL的表达显著降低,差异有统计学意义;环磷酰胺组卵巢的BMP15、FMR1、GDF9、INHA、AMH、KIT、KITL的表达降低,但差异尚无统计学差异;雷公藤组卵巢BMP15、FMR1、GDF9、AMH、KIT表达显著增高,FOXL2表达显著降低,差异有统计学意义。结论:本研究中所用顺铂和阿霉素给药方法能够快速成功地构建卵巢早衰小鼠模型;环磷酰胺和雷公藤组尚需增加给药剂量/给药时间、或延长观察时间。卵巢早衰相关因子表达量的测定及各种模型的综合比较提示FMR1、FOXL2、FSHR、AMH、PTEN、KITL可能是药物致卵巢早衰发生的关键基因,其中FOXL2可能是卵巢早衰发生的早期敏感指标;BMP15、GDF9、FMR1、AMH在卵巢早衰发生发展过程中可能会表现为其表达先显著上调、后显著降低。
【作者单位】:浙江大学医学院附属妇产科医院
【分类号】:R-332;R711.75

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