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《第二十次全国儿科中西医结合学术会议资料汇编》2016年
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针对细胞表面网格蛋白重链的siRNA抑制RSV感染Hela细胞的效果评价

熊小芬  赵耀  崔玉霞  
【摘要】:目的拟通过RNA干扰技术沉默细胞表面网格蛋白重链的表达,从而抑制RSV感染Hela细胞,为RSV抗病毒药物的研究提供科学依据。方法美国QIAGEN公司定制经验证有效的针对网格蛋白重链的siRNA;采用实时荧光定量PCR技术和Western blot技术分别从基因水平和蛋白水平验证siRNA在Hela细胞上的特异性沉默效果;经验证有效的siRNA转染Hela细胞48h后,接种RSV病毒,感染复数为1,待空白对照组出现明显细胞病变时,收集各实验组病毒液上清,通过检测各组病毒液上清的细胞半数感染量(TCID50)来评价siRNA抑制RSV感染Hela细胞的效果。结果从QIAGEN公司定制的siRNA可有效的沉默Hela细胞上特异性基因及蛋白的表达,其中以浓度为100nm的siRNA的沉默效果最好,抑制率高达94.6%;TCID50实验显示siRNA作用组的log10TCID50明显比对照组的低,为4.78±0.09,与空白对照组比较P0.05。结论通过siRNA沉默细胞表面网格蛋白重链的表达,可有效的抑制RSV感染Hela细胞。
【作者单位】:贵州省妇女儿童医院 重庆医科大学附属儿童医院
【分类号】:R373

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