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《中国中西医结合学会诊断专业委员会第十次全国学术会议论文集》2016年
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补虚活血中药对虚中夹瘀证RCS大鼠视网膜RHO、XBP1、Caspase12表达的影响

徐剑  彭俊  周亚莎  潘坤  吴权龙  李建超  刘悦  刘家琪  陈柯竹  彭清华  
【摘要】:目的:观察补虚活血中药枸杞子加丹参对虚中夹瘀证RCS大鼠视网膜RHO、XBP1、Caspase12表达的影响,以及探讨RHO、XBP1、Caspase12表达的相互关系。从通过减轻视网膜感光细胞内质网应激反应以及减少内质网凋亡通路从而改善视网膜感光细胞分泌RHO蛋白方面,探讨枸杞子加丹参治疗"虚中夹瘀"证型视网膜色素变性的分子机制。方法:实验动物分5组,每组8只,雌雄各半,鼠龄匹配。RCS(rdy+/+,p+/+)空白组、RCS(rdy-/-,p-/-)模型组、RCS(rdy-/-,p-/-)枸杞组、RCS(rdy-/-,p-/-)丹参组及RCS(rdy-/-,p-/-)枸杞加丹参组(杞参组)。分别灌胃:0.9%NS、0.9%NS、枸杞子、丹参、枸杞子加丹参。灌胃28天后,免疫组化法观察各组视网膜组织中RH0、XBP1、Caspase12表达,RT-qPCR法及Western Blot法分别测定各组视网膜组织中RHO、XBP1、Caspase12 mRNA及蛋白相对表达水平。并对WB检测的RHO、XBP1、Caspase12蛋白相对表达水平行相关性分析。结果:(1)IHC:杞参组视网膜上RHO蛋白阳性表达较模型组明显增多;杞参组视网膜上XBP1、Caspase12蛋白阳性表达较模型组明显减少。(2)RCR:杞参组RHO mRNA相对表达量明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05),且接近大鼠空白组(ANOVA检验)。杞参组XBP1、Caspase12 mRNA相对表达量明显低于模型组,差异有显著统计学意义(P0.01),且接近空白对照组。(3)WB:杞参组RHO蛋白相对表达量高于模型组,差异有统计学意义(P0.05),且接近RCS(rdy+/+,p+/+)大鼠空白组。杞参组XBP1、Caspase12蛋白相对表达量低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),且接近空白组。(4)RHO、XBP1蛋白相对表达量呈负相关且相关性显著(r=-0.597,P0.01);RHO、Caspase12蛋白相对表达量呈负相关且相关性显著(r=-0.588,P0.01);XBP1、Caspase12蛋白相对表达量呈正相关且相关性显著(r=0.512,P0.01)。结论:RCS大鼠视网膜组织RHO与XBP1蛋白相对表达量呈负相关且相关性显著,RHO、Caspase12蛋白相对表达量呈负相关且相关性显著,XBP1与Caspase12蛋白相对表达量呈正相关且相关性显著。枸杞加丹参可以上调"虚中夹瘀"证RCS(rdy-/-,p-/-)大鼠视网膜中反映感光细胞功能的RHO表达,减弱反映内质网应激水平的XBP1,减弱反映内质网凋亡途径的Caspase12的表达。推测枸杞丹参治疗"虚中夹瘀"证RCS(rdy-/-,p-/-)大鼠机制为:枸杞丹参改善RCS(rdy-/-,p-/-)大鼠的"虚"证与"瘀"证,从而减少视网膜损伤因素,减轻视网膜细胞的ERS,下调视网膜细胞内质网应激因子XBP1及内质网凋亡途径诱导因子Caspase12表达,减少视网膜感光细胞变性凋亡,促进RHO表达。
【作者单位】:湖南中医药大学第一附属医院眼科学重点学科
【分类号】:R285.5
【正文快照】:
视网膜色素变性(Retinitsi Pigmentosa,RP)属于眼科临床的疑难病症。其为一组常见的、进行性遗传异质性的视网膜变性类疾病,发病率约ljOOOl1】。导师团队既往大量的临床观察和机理研究,证实RP患者多数为本虚夹瘀之证,临床上阴虚夹瘀、阳虚夹瘀证型。治疗采用滋阴活血、温阳活

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