高糖乏氧环境下大鼠海马神经元HIF-1α、Nox4、p47~(phox)因子的表达及脑神康胶囊的干预作用

【摘要】：目的研究高糖乏氧环境下体外培养的大鼠海马神经元HIF-1α、Nox4、p47~(phox)因子的表达及探讨脑神康胶囊对损伤神经元的保护作用机制。方法原代培养大鼠海马神经元,将细胞随机分为6组:正常对照组,高糖乏氧组,黄芪组,脑神康低(5ml/kg)、中(10ml/kg)、高剂量(20ml/kg)组。正常对照组用低糖型DMEM培养基培养,其余5组用葡萄糖浓度为25mmol/L的DMEM培养基培养,8天后除正常对照组外,其余各组均用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶处理建立氧化损伤模型,其中黄芪组及中药各剂量组分别在加入黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶之前换以黄芪和不同浓度中药含药血清的DMEM培养液,干预12h后用MTT法测细胞存活率,流式细胞术测细胞凋亡率,Real-time PCR法检测各组海马神经元HIF-1αmRNA、Nox4mRNA、p47~(phox) mRNA的表达。结果与正常对照组比较,高糖乏氧组神经元存活率显著下降,神经元凋亡率,HIF-1αmRNA、Nox4 mRNA和p47~(phox) mRNA的表达显著上升(P均0.01);与高糖乏氧组比较,黄芪组及脑神康各浓度组神经元存活率明显上升,神经元凋亡率,HIF-1αmRNA、Nox4 mRNA和p47~(phox) mRNA的表达均下降,其中高浓度组最低,具有明显的统计学意义(P均0.05)。结论脑神康胶囊对高糖乏氧环境下大鼠海马神经元有明显的保护作用,其作用机制可能为下调HIF-1αmRNA、Nox4 mRNA和p47~(phox) mRNA的表达,减轻氧化应激损伤相关。