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《中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集》2011年
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MOR、DOR和KOR基因干扰RNA表达载体的构建

程飚  刘宏伟  唐建兵  朱江婷  彭艳  项晓飞  
【摘要】:目的:构建大鼠mu-、delta-和kappa-型阿片受体(MOR、DOR和KOR)基因干扰RNA的表达,为研究皮肤瘙痒的分子机制奠定基础。方法:以含大鼠全长mu-、delta-和kappa-型阿片受体基因的载体为模板,分别用软件(http:.//www.ambion.com/techlib/misc/siRNA finder.html)在线设计3对针对MOR、DOR和KOR的siRNA引物和各自的阴性对照引物,将各片段插入BglⅡ,HindⅢ之间。载体转染成纤维细胞中,应用荧光显微镜观察GFP表达情况。结果:转染的成纤维细胞都可以观察到绿色荧光。应用免疫荧光法可观察到目的基因M、D和K型阿片受体的表达。结论:成功构建MOR、DOR和KOR基因干扰RNA在成纤维细胞中实现了高效表达。

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