蓝莓对体外培养大鼠肝星状细胞增殖及凋亡的影响

【摘要】：目的:探讨蓝莓对体外培养大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及凋亡有无影响。方法:分别用低、高剂量蓝莓汁予大鼠灌胃5天制备蓝莓血清;用Ⅳ型胶原酶、链蛋白酶E经门静脉循环灌注大鼠肝脏,Nycodenz密度梯度离心方法分离、培养HSC;分别用5%、10%浓度的蓝莓低、高剂量血清干预体外培养的HSC;用噻唑蓝(MTT)比色法测定HSC增殖,免疫细胞化学法检测HSC凋亡相关蛋白P53、Bcl-2的表达。结果:蓝莓血清能抑制HSC的增殖,无明显的剂量依赖关系。当血清浓度为5%时,蓝莓高剂量组对HSC增殖的抑制作用较低剂量组强,两组间比较差异无统计学意义(P0.05),与正常对照组比较,蓝莓低、高剂量组均能显著抑制HSC的增殖(P0.05、P0.01);当血清浓度为10%时,蓝莓低剂量组对HSC增殖的抑制作用较高剂量组强,两组间以及与正常对照组间比较差异均无统计学意义(P0.05)。蓝莓血清干预HSC 48h后,光镜下见HSC间隙增大、细胞由星形或梭形变为圆形、胞体变小等不同程度细胞凋亡的形态学改变,尤以5%蓝莓高剂量血清组最明显,正常对照血清组未见上述改变;5%蓝莓高剂量血清组凋亡相关蛋白P53及Bcl-2阳性细胞百分率分别为(45.68±5.79)%及(80.70±2.46)%,相同浓度正常对照血清组分别为(31.32±3.77)%及(88.82±3.23)%,两组间比较差异具有统计学意义(P0.01、P0.05)。结论:蓝莓能抑制HSC增殖,诱导HSC凋亡;HSC的凋亡可能是通过上调促凋亡基因P53的表达、下调抗凋亡基因Bcl-2的表达诱导的;蓝莓对肝纤维化的形成可能有一定的抑制作用。