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《第十八届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编》2011年
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骨性关节炎软骨下骨成骨细胞的分离培养与生物学活性的观察

郭悦  张玮  张杨  孙晓雷  李秀兰  
【摘要】:目的:建立骨性关节炎软骨下骨成骨细胞的分离培养方法,构建软骨下骨成骨细胞与软骨细胞共培养体系,观察软骨细胞对软骨下骨成骨细胞增殖及功能活性的影响。方法:(1)细胞获取及鉴定:应用改良Hulth造模法建立兔膝关节炎模型,无菌条件下分离膝关节软骨下骨,采用Ⅰ型胶原酶消化联合组织块贴附法获得软骨下骨成骨细胞,进行形态学观察及生物学鉴定。(2)共培养:软骨下骨成骨细胞与软骨细胞共培养组与单纯软骨下骨成骨细胞组作对照,MTT法检测两组软骨下骨成骨细胞的增殖活性,RT-PCR法检测软骨下骨成骨细胞Ⅰ型胶原基因表达水平。结果:(1)经Ⅰ型胶原酶消化后的组织块在贴附第11天开始有细胞爬出,胞核饱满,核仁清晰,Ⅰ型胶原染色呈阳性。(2)培养3天时,共培养组中软骨下骨成骨细胞的增殖活性明显高于单纯软骨下骨细胞组(P0.05)。在第6、10、14天,单纯软骨下骨成骨细胞的增殖活性均高于共培养组(P0.05),其中在第10天时最高。共培养组软骨下骨成骨细胞Ⅰ型胶原表达明显高于单纯软骨下骨成骨细胞组(P0.05)。结论:改良Hulth造模法能够成功建立骨性关节炎模型,Ⅰ型胶原酶消化联合组织块贴附法可获得较纯的软骨下骨成骨细胞。构建软骨下骨成骨细胞与软骨细胞共培养的体系,模拟OA微环境,为进一步探讨软骨下骨在OA发生发展过程中的作用提供理论依据。
【作者单位】:天津市天津医院
【分类号】:R684.3

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