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《第六届全国中西医结合基础理论研究学术研讨会暨第二届湖南省中西医结合学会肝病专业学术年会论文集》2010年
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补肾填精药促进间充质干细胞增殖的效应及机制研究

张进  黄进  徐志伟  
【摘要】:目的:在"干细胞具先天之精的属性,是先天之精在细胞层次的存在形式"、"精血同源,,等理论的指导下,本研究运用补精生血法、补精滋阴法、补精壮阳法来探讨补肾益精法对骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖的影响及机制。方法:运用全骨髓贴壁法分离、培养MSCs,运用MTT法筛选对MSCs增殖具有促进作用的益精中药的单体、有效成分及含药血清,并研究其最佳促增殖时间、浓度。以RT-PCR检测不同细胞因子mRNA表达;Real-time PCR检测mRNA表达;Western-blot检测蛋白表达;ELISA法检测培养上清液蛋白含量。结果:10~(-4)mol/LTHSG、10%何首乌含药血清诱导培养MSCs 72h后,可促进MSCs增殖,在此过程中,均明显促进细胞SCF mRNA表达。10~(-4mol/LTHSG明显促进膜结合型与可溶性两种SCF蛋白表达,10%何首乌含药血清明显促进可溶性SCF蛋白的分泌,与空白组、空白血清组相比有显著性差异。10%黄精含药血清诱导培养MSCs 72h后,可促进MSCs增殖,在此过程中,明显促进细胞G-CSF mRNA及G-CSF蛋白表达,与空白血清组相比有显著性差异。1mg/mL巴戟天多糖、10%菟丝子含药血清诱导培养MSCs 72h后,可促进MSCs增殖。在此过程中,1mg/mL巴戟天多糖明显促进细胞LIF、GM-CSF mRNA及LIF蛋白表达,10%菟丝子含药血清明显促进细胞BMP-2 mRNA表达,与空白组、空白血清组相比有显著性差异。结论:10~(-4)mol/L THSG可促进MSCs增殖,可能与其促进细胞SCF mRNA、膜结合型与可溶性两种SCF蛋白表达有关。10%何首乌含药血清可促进MSCs增殖,可能与其促进细胞SCF mRNA及可溶性SCF蛋白表达有关。10%黄精含药血清促进MSCs增殖的作用,可能与其促进细胞G-CSFmRNA及G-CSF蛋白表达有关。10%菟丝子含药血清促进MSCs增殖的作用,可能与其促进细胞BMP-2 mRNA表达有关。1mg/mL巴戟天多糖促进MSCs增殖的作用,可能与其促进细胞LIF、GM-CSF mRNA及LIF蛋白表达有关。本研究提示补肾填精中药可通过不同机制促进干细胞增殖,本结果为证明"精"的干细胞学说提供了充分的科学依据。

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