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《中国中西医结合学会脊柱医学专业委员会2008年学术会议论文汇编》2008年
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鹿茸多肽对兔关节软骨细胞体外凋亡的影响

修忠标  林建华  
【摘要】:通过观察鹿茸多肽对白细胞介素-1β体外诱导软骨细胞凋亡的影响,以优化软骨组织工程的种子细胞。取新西兰大白兔关节软骨,用0.25%胰蛋白酶和0.2%Ⅱ型胶原酶消化后获得兔软骨细胞,并于体外培养。将第3代软骨细胞随机分成 A 组(空白对照组),B 组(IL-1β组),C 组(鹿茸多肽组),D 组(TGF-β_1组)。采用透射电镜观察细胞形态,用 Annexin V 法检测细胞凋亡率,RT-PCR 技术分析 Caspase-3 mRNA 表达水平,ELISA 法检测 Caspase-3蛋白酶活性。结果显示 B 组24h 后细胞核内染色质开始呈块状凝集,分布于核膜下,核膜不规则;48 h 后细胞核内染色质凝集加剧;72h 后部分细胞内的核碎片凝集成凋亡小体;各时间点 C、D 组细胞结构改变相对滞后、且数量较少,而 A 组细胞结构几乎无明显改变。各时间点 B 组细胞凋亡率、Caspase-3 mRNA 表达及蛋白酶活性逐渐增高,与 A 组比较差异有统计学意义(p0.01);C、D 组与 B 组比较则逐渐下降,且差异有统计学意义(p0.01)。说明 Caspase-3参与细胞凋亡,鹿茸多肽通过减少 Caspase-3 mRNA 表达,并抑制其蛋白酶活性,来阻止或逆转软骨细胞凋亡。

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【参考文献】
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