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中药土鳖虫基于SELDI-TOF技术的蛋白质组分析

李春梅  王若光  尤昭玲  刘小丽  刘惠萍  熊德慧  胡维新  
【摘要】:目的对传统中药土鳖虫蛋白肽成分进行蛋白质组初步分析,建立阿胶蛋白质质量指纹图。方法采用饱和硫酸胺沉淀,透析脱盐冻干法获得阿胶水溶性蛋白肽,采用 Ciphergen Biosystems Inc.Protein Chip or Biol- ogy System(美国 PBSⅡ+)及配套的 NP10芯片、激光解析离子化-飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS),分析土鳖虫 Mr 1500~13000区间蛋白质、肽分布及其相对分子质量。结果土鳖虫水溶性蛋白质/肽分子量共显示计20 个肽分子量峰,根据对比氨基酸分子量分析,土鳖虫水溶性肽成分数量较少,4000Da 以下无峰出现。土鳖虫盐析过程中,沉淀蛋白上浮部分(G2-2)和下沉部分(G1-1),4500~5000Da 检测到4个分子量峰,5200~5 400Da 检测到5个分子量峰,8000~8600Da 检测到4个分子量峰,11000~12000Da 检测到7个相对分子量峰。结论通过分析,可以形成土鳖虫水溶性蛋白质/肽成分质量指纹图(PMF),可作为土鳖虫数字化质控标准;并为进一步分离、纯化及验证土鳖虫功能相关活性蛋白质/肽成分打下基础,并对中药资源的可持续利用有积极意义。

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