收藏本站
《中国中西医结合学会第十二次全国消化系统疾病学术研讨会论文汇编》2000年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

幽门螺杆菌粘附素基因hpaA的克隆、序列分析及原核表达

陈烨  王继德  周殿元  张兆山  
【摘要】:正目的:我们选择暴露于细菌表面并与Hp定植致病密切相关的粘附素HpaA为目标,期望通过基因工程技术获得具有较好免疫原性的重组粘附素,为制备Hp粘附素源疫苗打下基础.方法:设计幽门螺杆菌粘附素基因HpaA的特异引物,5’端引入EcoRI和BamHI双酶切位点,PCR钓出目的基因进行载体和目的基因DNA片断的酶切、连接、转化,双酶切鉴定筛选出阳性克隆,Sanger’s双脱氧法测定DNA序列以确证其正确性;将目的基因亚克隆入表达载体并在大肠杆菌中以不同的条件诱导其表达,SDS-PAGE及Western blot方法检测表达产物及其抗原性,硫酸铵分级沉淀和阴离子交换层析法纯化表达产物.

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 洪愉;幽门螺杆菌粘附素的研究进展[J];中国人兽共患病杂志;2004年01期
2 吴利先,杨致邦,林珊珊,刘淼;幽门螺杆菌临床株粘附素HpaA基因的克隆表达及在诊断中的价值[J];中国人兽共患病杂志;2004年04期
3 刘正祥,邹全明,洪愉,朱永红;重组幽门螺杆菌粘附素工程菌高密度发酵条件的研究[J];第三军医大学学报;2004年15期
4 吴利先,郑致邦;幽门螺杆菌粘附素hpa A和霍乱毒素B亚单位ctx B融合基因的原核表达[J];中国生物制品学杂志;2004年05期
5 Ruoslahti E;Giancotti FG;官奇;;粘附素与肿瘤细胞扩散[J];国际输血及血液学杂志;1991年03期
6 郑铃,洪新如,陈豪,郑秀芬,陈锦英;致肾盂肾炎大肠埃希菌粘附素重组蛋白诱导小鼠免疫应答[J];中国人兽共患病杂志;2004年10期
7 Thorms C.J. ,蒋仲芳;用于预防牛肠炎的商品菌苗中K_(99)(F_5)纤毛粘附素的鉴定[J];微生物学免疫学进展;1991年02期
8 ;泌尿道病原性大肠埃希氏菌Dr粘附素的表达与抗生素耐药性的相关性[J];国外医药.抗生素分册;2001年05期
9 张道理;王继德;;幽门螺杆菌粘附素的研究进展[J];国外医学(微生物学分册);1998年05期
10 闫文生,姜勇;钙依赖性粘附素及其信号转导[J];生理科学进展;2000年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈烨;王继德;周殿元;张兆山;;幽门螺杆菌粘附素基因hpaA的克隆、序列分析及原核表达[A];中国中西医结合学会第十二次全国消化系统疾病学术研讨会论文汇编[C];2000年
2 陈烨;周殿元;王继德;叶桂安;梁卫江;;幽门螺杆菌重组粘附素HpaA生物学活性及免疫原性的体外研究[A];中国中西医结合学会第十二次全国消化系统疾病学术研讨会论文汇编[C];2000年
3 朱森林;陈旻湖;廖文俊;陈洁;陈为;胡品津;;含幽门螺杆菌hpaA重组减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建和鉴定[A];中国中西医结合学会第十二次全国消化系统疾病学术研讨会论文汇编[C];2000年
4 王瑜;雷连成;韩文瑜;李林溪;谢芳;;胸膜肺炎放线杆菌三聚体自转运粘附素N端基因序列和功能区的分析[A];中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会(第三届中国兽药大会学术论坛)论文集[C];2010年
5 孟怀旺;蓝洪;米自由;范首君;苏军;;乳杆菌抗病机制研究进展[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十五次学术研讨会论文集[C];2010年
6 方瑶;顾江;于波;王海光;毛旭虎;;类鼻疽伯克霍尔德菌粘附素1434基因的克隆表达及免疫学性质鉴定[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年
7 陈烨;王继德;叶桂安;张亚历;周殿元;;幽门螺杆菌重组粘附素rHpaA免疫保护作用的动物实验研究[A];中国中西医结合学会第十二次全国消化系统疾病学术研讨会论文汇编[C];2000年
8 刘尚全;杨颖;唐金凤;李凤英;周丽斌;陈名道;;长时间应用糖皮质激素大鼠HPAA功能的连续变化[A];全国首届代谢综合征的基础与临床专题学术会议论文汇编[C];2004年
9 李扬;韩文瑜;雷连成;石蕾;;GST-MrkD融合蛋白的表达纯化、鉴定及其粘附活性研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
10 斯大勇;张日俊;;乳酸菌粘附机制研究进展[A];第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 小雪;污染饮水和食物的罪魁——大肠杆菌[N];中国医药报;2004年
2 记者 李水根 通讯员 施水泉;婴幼儿顽固性腹泻病因找到[N];健康报;2001年
3 范高明;艾格生蛋黄免疫球蛋白 筑起国民免疫新长城[N];中国高新技术产业导报;2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈烨;幽门螺杆菌粘附素HpaA的克隆、表达及其免疫原性和保护性研究[D];第一军医大学;2000年
2 郑铃;致肾盂肾炎大肠埃希菌粘附素基因papG的克隆表达及其免疫保护作用的初步研究[D];天津医科大学;2003年
3 钟世顺;双歧杆菌分泌型粘附素体外调节肠上皮细胞生物学功能的实验研究[D];第一军医大学;2004年
4 白杨;表达幽门螺杆菌粘附素保守区的减毒鼠伤寒沙门菌的构建及其免疫治疗作用的研究[D];第一军医大学;2002年
5 杨宏军;奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌毒力因子的克隆表达及生物活性研究[D];山东农业大学;2007年
6 何佳燕;粘附素及其他致病相关因子在中间普氏菌与人上皮细胞互作中的作用研究[D];浙江大学;2010年
7 刘淑杰;大肠杆菌粘附素亚基FaeG在Lactococcus lactis中的表达及免疫原性研究[D];江南大学;2010年
8 孙波;幽门螺杆菌多价口服核酸疫苗实验研究[D];第二军医大学;2004年
9 徐灿;幽门螺杆菌尿素酶B和黏附素A核酸疫苗的研究[D];第二军医大学;2004年
10 刘鑫;猪肠毒素大肠杆菌(ETEC)F4受体相关候选基因的筛选与表达研究[D];湖南农业大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吴利先;幽门螺杆菌HpaA-CtxB融合蛋白的研制及免疫原性研究[D];重庆医科大学;2004年
2 吴学敏;嗜水气单胞菌主要粘附素基因序列及其重组基因表达产物功能分析[D];福建农林大学;2010年
3 高峰;幽门螺杆菌重组Bb-vacA-hpaA候选疫苗的构建[D];大理学院;2011年
4 袁万哲;仔猪大肠杆菌病K88-K99-987P-F41四价亚单位疫苗的研制[D];南京农业大学;2004年
5 张际青;粘附素-5 N端CED-4基因转染及其对MDA-MB-435细胞增殖影响的研究[D];江西医学院;2004年
6 范贵荣;抗幽门螺杆菌VacA和HpaA双特异性单克隆抗体的制备[D];重庆医科大学;2009年
7 王念;肺炎克雷伯杆菌粘附作用与细菌毒力相关性的初步探讨[D];四川大学;2006年
8 王英杰;奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌相关毒力因子的研究[D];山东师范大学;2008年
9 李振;猪唾液酸粘附素抗原表位蛋白在大肠杆菌体内的表达及其多克隆抗体的制备[D];河北农业大学;2012年
10 唐俊;循环冷却水系统缓蚀阻垢剂的开发应用研究[D];华东师范大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026