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《中国药理学会第十一次全国学术会议专刊》2011年
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巴戟天糖链对人脐静脉内皮细胞血管新生的作用

王宁  冯国清  
【摘要】:目的观察巴戟天糖链(MOO)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移、管腔结构数及对ERK1/2蛋白及其磷酸化水平的影响,探讨其促血管生成效应和相关机制。方法选取3~8代状态良好的HUVEC细胞,建立缺氧复氧损伤(H/R)模型;将细胞分为:正常培养组,缺复氧模型组(H/R),H/R+阳性药物组,H/R+MOO 50,150和450 mg·L~(-1)后给予不同剂量药物干预24h,用倒置显微镜观察其生长状态后,①采用transwell小室迁移实验检测MOO对体外内皮细胞的迁移作用;②采用小管形成实验检测MOO对内皮细胞细胞形成管腔结构的影响;③采用蛋白印迹法检测MOO对内皮细胞中ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达情况。结果①与H/R模型组相比MOO各剂量组对HUVEC细胞缺氧复氧损伤后的细胞形态均显示出不同程度的保护作用。流式细胞检测结果显示:MOO各剂量组显著增加了(G2+S)期的细胞比例(40.79±9.06,45.40±2.56,60.63±2.13 vs 15.28±4.07,P0.05)。②与H/R模型组相比,MOO各剂量组可明显增加缺氧复氧损伤内皮细胞的迁移数目H/R模型组。③MOO大、中、小剂量组细胞培养6 h即可见有细胞间的相互连接形态,18 h在martrigel表面形成完整的管腔样结构,并随着浓度的增加和培养时间的延长,管腔结构增多。缺氧复氧损伤模型组细胞在18 h后才开始相互连接,24 h未能在基质胶表面形成完整的管腔样结构;计算机图像分析软件处理MOO各剂量组小管形成面积显著大于H/R模型组(1.59±0.08,1.68±0.23,1.98±0.16 vs 1±0.09,P0.05)。④Western-blotting结果显示:与正常组相比,模型组ERK1/2的磷酸化水平明显减少(0.288±0.079 vs 0.447±0.014,P0.05);与模型组相比,MOO各剂量组ERK1/2的磷酸化水平显著升高(0.361±0.199,0.507±0.146,0.566±0.066 vs 0.288±0.079,P0.05),巴戟天糖链对各组ERK1/2的磷酸化水平与用药剂量正相关。结论①巴戟天糖链可以显著减轻H/R对血管内皮细胞的损伤,促进细胞增殖。②巴戟天糖链能有效促进H/R损伤的内皮细胞迁移和小管形成,促进HUVEC的血管发生。③ERK1/2蛋白的磷酸化参与了巴戟天糖链的促血管新生作用。
【作者单位】:郑州大学基础医学院药理学系
【分类号】:R285

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