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《2011全国老年痴呆与衰老相关疾病学术会议第三届山东省神经内科医师(学术)论坛论文汇编》2011年
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鼠Kir6.2基因真核表达载体的构建及其在HEK293细胞中表达的研究

任晓燕  谭淑慧  马国诏  杜怡峰  
【摘要】:目的克隆ATP敏感性钾离子通道亚基Kir6.2基因(ATP-sensitive K+channel subunit Kir6.2),并构建真核表达载体pcDNA3.0/Kir6.2,将重组质粒转染HEK293细胞获得高表达Kir6.2基因的HEK293细胞克隆。方法从SD(Sprague Dawley,SD)大鼠脑组织中提取总RNA,用RT-PCR方法获得Kir6.2基因的全长cDNA,插入T1-simple克隆载体中进行序列测定,测序正确后将其亚克隆至表达载体pCDNA3.0,利用脂质体将重组质粒转染HEK293细胞,经G418筛选获得抗性细胞克隆,采用RT-PCR和Western Blot方法鉴定Kir6.2基因在HEK293细胞中的过表达。
【作者单位】:山东大学附属省立医院神经内科
【基金】:国家自然科学基金面上项目(30870874)
【分类号】:Q78

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