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《2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集》2009年
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带黄素抑制HL-60/ADR耐药细胞增殖和诱导凋亡的作用

陈英玉  郑合勇  胡建达  郑志宏  郑静  连晓岚  吕联煌  
【摘要】:目的探讨中药大黄素(emodin)对人白血病耐药细胞株HL-60/ADR的增殖、凋亡影响及其相应的可能作用机制。方法采用MTT法绘制细胞生长曲线;集落培养法观察大黄素对HL-60/ADR克隆形成的影响;细胞周期分析、线粒体跨膜电位改变检测、Caspase-3酶活性检测、Annexin V FITC/PI法、TdT酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)分析凋亡细胞;RT-PCR及Western blot法检测大黄素作用后不同时间段bcl-2、c-myc基因mRNA及Bcl-2、c-Myc、Caspase-3前体蛋白表达水平的变化。结果大黄素对HL-60/ADR细胞增殖具有明显的抑制作用,呈时间和浓度依赖性。较低浓度大黄素即可抑制HL-60/ADR细胞集落形成,IC50值为5.79μmol/L。细胞周期分析显示,与对照组比较,40、80μmol/L,浓度组细胞被阻滞于G0/G1期比率明显增高(P0.01),G2/M期细胞比率降低(P0.01),而20μmol/L浓度组细胞周期改变差异不具有显著性(P0.05),各浓度组均检测到典型的亚二倍体峰(凋亡峰)。大黄素作用12小时HL-60/ADR细胞线粒体跨膜电位降低,Annexin V FITC/PI法检测到早期凋亡细胞,作用24小时,Caspase-3酶活性显著升高,作用48小时,TUNEL法检测到晚期凋亡细胞,细胞凋亡率呈药物浓度依赖性。大黄素作用HL-60/ADR细胞不同时间段,bcl-2、c-myc mRNA和Bcl-2、c-Myc、Caspase-3前体蛋白表达水平均有不同程度下调,并呈时间依赖性。结论大黄素能够有效抑制HL-60/ADR细胞增殖,并诱导其凋亡,bcl-2、c-myc表达水平下调,线粒体跨膜电位水平降低,Caspase-3激活可能参与了该过程。
【作者单位】:福建医科大学附属协和医院福建省血液病研究所
【分类号】:R733.7

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