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《2006年全国药物毒理学会议论文集》2006年
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阿嗪米特致突变作用实验研究

罗鹏  张爱华  潘雪莉  
【摘要】:目的:了解阿嗪米特在体外有无致突变作用。方法:采用中国仓鼠肺细胞(CHL) 进行染色体畸变试验,观察阿嗪米特的致突变性,用含10%的小牛血清和双抗(青霉素的终浓度为100U/ml,链霉素的终浓度为100 μg·mL-1)的MEM培养液于37℃,5%的CO2条件下半开放式贴壁培养。①细胞毒性试验:采用台酚蓝染色检测CHL细胞接触阿嗪米特24和 48小时的半数细胞生长抑制浓度(IC50),作为剂量选择的依据。②染色体畸变试验:以 CHL细胞进行加与不加S9的染色体畸变试验。按(5~10)×104个·mL-1的密度接种细胞, 24小时贴壁后进行实验。不加S9时,培养瓶内加入4.95mL培养液,50μL受试物,培养24 和48小时;加S9时,培养瓶内加入4.45mL培养液,50μL受试物,0.5mL S9混合液,培养 6小时后,弃培养液,PBS洗涤,再加入MEM培养液5mL,继续培养至24和48小时。分别于收获前4小时加入终浓度为0.2 μg·mL-1。的秋水仙碱。阿嗪米特设600,300,150 μg·mL-1 三个剂量组、并设阴性对照、DMSO溶剂对照、S9对照组。阳性对照组分为不加S9试验的阳性对照(MMC 0.5 μg·mL-1,作用24小时;0.25 μg·mL-1,作用48h)和加S9试验的阳性对照(CP 20 μg·mL-1,作用6小时)。收获细胞后,常规低渗、固定、制片和染色,每个剂量组油镜下观察分裂中期相细胞100个,记录畸变类型,计算细胞染色体畸变率(%)。各试验剂量均作平行样两份,重复试验一次。结果:细胞毒性试验结果显示CHL细胞接触阿嗪米特 24和48小时的IC50为600μg·mL-1;染色体畸变试验结果显示,无论是培养24或48小时, 还是加S9或不加S9,阳性对照组的染色体畸变率均显著高于阴性对照组,差异具有显著性 (P0.01),畸变类型以断裂、缺失和交换为主;阿嗪米特各剂量组的染色体畸变率与阴性对照组比较均无显著性差异(P0.05)。结论:阿嗪米特在体外CHL细胞染色体畸变试验中结果为阴性,在本实验条件下,未发现其具有潜在的致突变性。

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