5-脂氧化酶转基因小鼠模型的制备

【摘要】：目的建立5-脂氧化酶(5-LO)转基因小鼠进行动脉粥样硬化的发病分子机制的研究。方法通过显微注射的方法,将5-脂氧化酶基因片段(6.8kb)导入BDF1受精卵雄原核并移植到同期受孕的假孕母鼠输卵管中,对产出仔鼠的鼠尾组织DNA进行PCR、southern blot检测,对9、20、24号转基因小鼠分别提取腹腔细胞、骨髓细胞及脾脏、肾组织总RNA和蛋白,并采用RT-PCR、western blot方法进行转录水平检测和蛋白表达检测。结果共产生25只子代小鼠,经PCR和southern检测获得7只阳性小鼠,检测结果表明9、20、24号转基因小鼠腹腔细胞、骨髓细胞及脾脏、肾组织5-LO和5-脂氧化酶激活蛋白(FLAP)在RNA和蛋白水平均高于正常C57BL/6对照小鼠,实验结果统计学分析均具有明显差异(PO.05)。结论成功建立5-LO转基因小鼠模型,为课题的下一步实验研究打下良好的基础。

【作者单位】：中国医科大学实验动物学部
【分类号】：Q78

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