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《中国遗传学会第十届全国激光生物学学术会议论文摘要集》2009年
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Bad不参与双氢青蒿素(DHA)诱导的人肺腺癌ASTC-a-1细胞的凋亡

卢盈颖  陈同生  
【摘要】:Bcl-2家族蛋白是细胞凋亡过程中关键的调节因子。Bad(Bcl-xl/Bcl-2相关死亡蛋白)作为一种新发现的bcl-2家族凋亡促进基因,其被认为是连接胞内存活/凋亡信号与线粒体凋亡机制的重要因子,故在肿瘤发生中所起的作用一直受到重视。研究表明在正常细胞中,Bad分布在胞质;当有凋亡信号时,Bad转位到线粒体,与Bcl-xl或者Bcl-2结合形成异二聚体,灭活Bcl-2和Bcl-XL抗凋亡效应,从而促进细胞凋亡。双氢青蒿素(Dihydroartemisinin,DHA)是我国学者首次从菊科植物黄花蒿(Artemisia annua)中提取的、新型一线抗疟疾药——青蒿素的一种活性较强的衍生物之一,近年来被认为具有很好的体内外抗肿瘤活性。但是,目前对于双氢青蒿素诱导肿瘤细胞凋亡的分子机制的研究还尚不清楚。本文以人肺腺癌ASTC-a-1细胞系为研究对象,主要通过质粒转染和激光扫描共聚焦显微成像等技术来探讨促凋亡蛋白Bad是否参与了双氢青蒿素诱导的ASTC-a-1细胞的凋亡。我们的实验结果表明:(1)Hoechst33258染色结果显示,对照组细胞核染色质着色均匀(图1,a),而双氢青蒿素处理组出现了凋亡特征:核染色质聚缩,凝集,着色明显增强,表明双氢青蒿素能诱导ASTC-a-1细胞凋亡(图1,b);(2)通过共转YFP-Bad与Ds-Red质粒,观察Bad在正常细胞中的定位情况:在未刺激条件下,Bad均匀的分布在胞质(图2); (3)星孢菌素(STS)处理6小时后,明显观察到Bad发生聚集,并转位到线粒体上(图3,a作为阳性对照),而用双氢青蒿素处理24 h,直至细胞发生皱缩变圆,Bad也未发生任何变化,仍然均匀的分布在胞质(图3,b),说明其未活化,因此结果表明促凋亡蛋白Bad未参与双氢青蒿素诱导的人肺腺癌ASTC-a-1细胞的凋亡。基于这项研究,希望能对双氢青蒿素的凋亡机理有进一步的认识,也为其将来在临床上作为一种可能的有效的治疗肺腺癌的新型药物提供了更加准确而有力的支持。

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