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《“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集》2011年
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日本鳗鲡肝脏抗菌肽的分离纯化

张东玲  黄文树  粱英  关瑞章  宋凯  
【摘要】:本试验应用超声波破碎细胞、醋酸粗提,加热,离子交换及反相高效液相色谱(HPLC)等技术,对日本鳗鲡肝脏抗菌肽进行了粗提、分离和纯化。用混合平板打孔法和微量反应96微孔法检测抗菌活性;用Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳检测HPLC分离的抗菌肽纯度并初步确定目的蛋白的分子量;最后应用质谱仪测定抗菌肽分子量。结果表明:日本鳗鲡肝脏的酸性粗提物对迟缓爱德华氏菌B09、气单胞菌B18、嗜水气单胞菌B27均具有很强的抗菌活性;加热后抗菌活性不但没有丢失,反而有所提高;经离子交换和HPLC纯化,抗菌肽对细菌的抗菌作用用一定的选择性,同时从日本鳗鲡肝脏分离纯化得到一种新型抗菌肽;进一步质谱仪测定抗菌肽分子量,抗菌活性峰分子质量为2388.05道尔顿。结论:在日本鳗鲡肝脏内存在大量抗菌活性物质,并具有一定的耐热能力;该项实验分离纯化得到一种新型抗菌肽,该抗菌肽对B09、B18具有一定的抗菌活性;建立了日本鳗肝脏抗菌肽的分离纯化的方法,为鳗鲡的病害防治开辟新途径,为研究和开发新型抗菌蛋白/肽药物积累基础数据。
【作者单位】:集美大学水产学院 集美大学水生生物技术研究所
【分类号】:S917.4

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