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松萝酸对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用机制研究

袁中伟  谷可欣  张天翼  李超  尹立子  
【摘要】:[目的]耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant S.aureus,MRSA),是一种广泛且危险的病原体,可导致多种疾病包括从轻微的皮肤感染到致命的肺炎和败血症。最为致命的是它对包括青霉素在内的大多数抗生素耐药。松萝酸是一种呋喃类强力抗生素,目前广泛应用于止血,抗菌,消炎。本实验的目的是通过研究松萝酸对USA300细胞膜和细胞壁通透性、蛋白质代谢、乳酸脱氢酶、形态结构和生物被膜的形成等方面的影响,阐述松萝酸抑制MRSA的作用机制,研究结果将为松萝酸及含松萝酸成分的中药用于抗MRSA感染提供可靠的理论依据。[方法]采用微量肉汤稀释法、琼脂平板菌落记数法和比浊法分别测定松萝酸对USA300的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)和生长曲线;通过测定外渗DNA量确定松萝酸对细胞膜和细胞壁的影响;通过SDS-PAGE和ELISA法分别检测松萝酸对可溶性蛋白代谢和乳酸脱氢酶(LDH)的影响;利用透射电镜观察经松萝酸处理后菌株的超微结构;通过结晶紫染色法测定松萝酸对生物被膜的影响。[结果]松萝酸对USA300菌株具有一定的抑制作用,其MIC为128μg·mL-1,MBC为512μg·mL-1。与对照组相比,2MIC松萝酸作用菌体1h后,DNA外渗量增加46.73±3.32 ng·μL-1,作用6 h后,菌体可溶性蛋白的含量降低13.36±3.11%。松萝酸能改变USA300菌体的固有形态。经64μg·mL-1松萝酸处理后,USA300生物被膜总量比对照组减少85.85±2.19%。[结论]松萝酸通过改变菌体细胞膜通透性,干扰其蛋白质代谢来抑制细菌的生长,破坏其固有形态,在亚抑菌浓度能够抑制生物被膜的形成。

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