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《中国毒理学会兽医毒理学委员会与中国畜牧兽医学会兽医食品卫生学分会联合学术研讨会暨中国毒理学会兽医毒理学委员会第5次全国会员代表大会会议论文集》2017年
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林可霉素耐药基因新亚型lnu(G)的功能及遗传环境分析

朱晓清  王晓明  李会  商艳红  潘玉善  吴聪明  汪洋  沈建忠  杜向党  
【摘要】:【目的】鉴定林可霉素耐药基因新亚型lnu(G)的功能,分析lnu(G)基因的遗传环境。【方法】本研究在猪源粪肠球菌E531全基因组测序的基础上,经序列分析、耐药基因克隆、药敏实验、UPLC-MS/MS、反向PCR、I-CeuI PFGE、southern blot等试验方法,鉴定了林可霉素耐药基因新亚型,命名为lnu(G)。【结果】lnu(G)与已报道的lnu(A)~lnu(F)基因的氨基酸序列存在不同程度的同源性(31%~76%)。耐药基因克隆及药敏试验显示,与对照菌(E.faecalis JH2-2+pAM401空载体)相比,含有lnu(G)耐药基因的粪肠球菌(E.faecalis JH2-2+pAM401+lnu(G))对林可霉素的耐药性提高了4倍。UPLC-MS/MS试验显示,lnu(G)编码的蛋白能催化林可霉素腺苷化。反向PCR及测序证实,lnu(G)位于一个长度为4.75kb的Tn544家族的转座子上,命名为Tn6260。该转座子与Tn554家族的其他转座子相比,均含有tnp(A)、tnp(B)、tnp(C)结构。I-CeuI-PFGE及Southern杂交试验显示,Tn6260位于肠球菌染色体上。【结论】本研究在猪源肠球菌上鉴定了一个林可霉素耐药新亚型lnu(G),该基因能催化林可霉素腺苷化,使细菌对林可霉素的耐药提高4倍,并且该耐药基因由转座子Tn6260携带,位于染色体上。

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