收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

副猪嗜血杆菌SC-1株荚膜多糖输出蛋白的表达及其免疫原性分析

张飞  都启晶  张洋溢  文心田  黄小波  曹三杰  
【摘要】:(方法)运用PCR方法扩增剐猪嗜血杆菌SC-1株荚膜多糖输出蛋白(capsularpolysaccharide export protein,CPEP)基因,克隆至pMD-19T载体。经鉴定测序验证后,用BamHⅠ、XhoⅠ行双酶切获得荚膜多糖输出蛋白基因,与相同方法酶切pET-32a(+)原核表达载体,连接酶切产物,构建原核表达质粒pET-32a-CPEP,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE以及Western-blot分析免疫原性分析,纯化CPEP,并用纯化的蛋白免疫小鼠,检测其特异性血清IgG抗体水平及攻毒保护率。(结果)结果显示,成功构建了原核表达质粒pET-32a-CPEP;SDS-PAGE分析结果显示,得到了大小约35 ku的蛋白;Western-blot分析显示,CPEP能与Hps SC-1阳性血清发生了抗原抗体的特异性反应,证实了该重组CPEP蛋白具有免疫原性。以致死剂量的强毒株SC-1攻毒,重组蛋白的免疫能够减缓发病并表现出40%的保护率。(结论)重组蛋白CPEP的部分保护作用表明其可以作为免疫候选因子,为未来副猪嗜血杆菌标准化疫苗的研制奠定基础。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 张飞;都启晶;张洋溢;文心田;黄小波;曹三杰;;副猪嗜血杆菌SC-1株荚膜多糖输出蛋白的表达及其免疫原性分析[J];畜牧兽医学报;2014年04期
2 ;[J];;年期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 沈琴芳;多杀性巴氏杆菌跨膜输出蛋白基因选择克隆载体的构建和应用[D];浙江大学;2006年
2 谭双;禽病原性大肠杆菌O2菌株跨膜输出蛋白基因文库的构建与分析[D];浙江大学;2009年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978