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《中国畜牧兽医学会生物制品学分会中国微生物学会兽医微生物学专业委员会2010年学术年会(第三届中国兽药大会学术论坛)论文集》2010年
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检测O型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析法的建立

祁光宇  智晓莹  任维维  黄银军  牟克斌  刘学荣  王宇  蒋韬  
【摘要】:目的:建立一种快速、简便的检测O型口蹄疫病毒(FMDV)的胶体金免疫层析法(GICA)。方法:采用柠檬酸三钠-鞣酸还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的标准株O型口蹄疫抗体。将纯化的口蹄疫流行株O/China99抗体和羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带。经试验条件优化,组装成胶体金快速诊断试纸条。结果:本试验研制的口蹄疫O型试剂盒具有良好的灵敏度,O型可检测到的3.9×10~4LD_(50)的病毒量。同时对阳性及阴性样品进行3次重复检测结果完全相同,说明其具有较好的重复性;特异性试验证实该方法在检测口蹄疫临床症状相似病原,如猪水疱病抗原(SVD)、水泡性口炎(VS)、水泡性疹(VES)等病毒时无交叉反应;试剂盒对53份阳性参考样本及78份阴性参考样本做了符合率试验,阳性样品和阴性样本的符合率分别为92.45%和100%,样品检出率为96.95%。试剂盒在4℃下可保存6个月。结论:建立的检测O型口蹄疫病毒(FMDV)胶体金免疫层析法是一种快速、灵敏、特异的FMD O型抗原检测方法,对基层现场具有广泛应用价值。

【参考文献】
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