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《动物检疫学分会2010年学术年会论文集》2010年
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实时荧光定量PCR检测猪流感病毒方法的建立

张太翔  凌宗帅  徐彪  梁成珠  朱来华  孙军  王洪兵  
【摘要】:建立了Taqman实时荧光定量PCR方法检测猪流感病毒(SIV)。选取SIV病毒的序列设计引物和探针。以梯度稀释的含有SIV目的扩增片段的质粒作为标准品,进行定量PCR反应以确定检测灵敏度。2.0*108~2.0*102个拷贝,7个数量级的范围内定量PCR有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为20个拷贝。根据病毒拷贝数与定量反应Ct值的关系,绘制了标准曲线。该方法具有特异性,对猪瘟病毒,伪狂犬病毒,口蹄疫病毒和蓝耳病病毒核酸都没有扩增反应。实时定量PCR检测SIV的方法,灵敏度高,特异性好,可以进行定量分析,在猪流感的快速检测上具有重要意义。

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【参考文献】
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