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犬肝细胞的分离和原代培养

侯聪敏  杨威  徐丽娜  马玉忠  
【摘要】:采用胶原酶两步灌流法,对犬肝细胞进行分离和原代培养.用台盼蓝拒染法测定肝细胞数和存活率.将细胞接种于大鼠尾胶原包被的培养板中,定期现察细胞形态,并测定培养上清液中ALT和AST活性.结果显示:每只犬可获得肝细胞7~8×109个,肝细胞成活率约为93.9%.体外培养的肝细胞形态完整、生长良好.6h、12h的培养上清液ALT活性与对照相比差异显著(P0.01,P0.05),但24h后恢复正常(P0.05).AST活性在不同时段没有显著变化(P0.05).体外培养的犬肝细胞可用于药物代谢、基因表达等的研究.

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