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《中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集》2010年
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猪流产嗜性衣原体MOMP基因的克隆及原核表达

李西玉  许信刚  周继章  邱昌庆  曹小安  宫晓炜  王光华  
【摘要】:【目的】克隆猪流产嗜性衣原体(Chlamydophila abortus,CA)青海株主要外膜蛋白(major outer membrane protein,MOMP)基因,并进行序列分析及原核表达。【方法】根据GenBank公布的CA MOMP基因的核苷酸序列,设计并合成一对特异性引物,用套式PCR方法扩增猪流产嗜性衣原体青海株MOMP基因,将其克隆入pMD18-T载体中,进行测序及序列分析。然后将MOMP基因亚克隆入原核表达载体pGEX4T-1中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导表达。【结果】扩增到1170bp的CA MOMP全长基因,序列分析结果表明,该基因与发表的猪流产嗜性衣原体B11001株和CP/12株核苷酸同源性均为99.7%。SDS-PAGE可检测到大小约为66ku的融合蛋白,主要以包涵体形式存在。Western-blot分析表明,重组蛋白可被猪衣原体阳性血清所识别。【结论】成功克隆了猪流产嗜性衣原体青海株MOMP基因并进行原核表达,为下一步研制猪流产嗜性衣原体诊断抗原奠定基础。

【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘烈刚,刘恭平,姚平,郝丽萍,杨雪峰,孙秀发,朱清华;维生素A缺乏对小鼠胚胎Hox-3.5 mRNA表达与胚胎发育关系的研究[J];癌变.畸变.突变;2003年03期
2 安兰敏,杨军,徐兵;铅对大鼠脑细胞凋亡的诱发作用及对P53基因表达影响的研究[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
3 王欣,褚建新,傅汝林,赵钧铭;清热解毒方对可移植性小鼠淋巴细胞白血病及其微小残留病疗效的比较研究[J];中医药临床杂志;2005年02期
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10 石卫民,范义湘,陈龙华,高蕾;两株人肝癌细胞QSG-7701和HepG2放射敏感性的体外研究[J];癌症;2002年09期
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3 杨彬;兰喜;殷相平;李学瑞;李宝玉;方玉萍;柳纪省;;口蹄疫病毒双效疫苗载体的构建及其体外表达研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
4 孟宪荣;周蕾蕾;栗绍文;周祖涛;毕丁仁;陈辉;齐冰玉;;猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ基因的表达及其单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(上册)[C];2009年
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10 胡秀芳;茶儿茶素对肾炎的药效及其机理研究[D];浙江大学;2001年
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3 陆玉成;AMF基因在食管鳞癌细胞株中的表达及功能初步分析[D];郑州大学;2010年
4 张磊;杜氏盐藻(Dunaliella salina)GPI多克隆抗体的制备及其在MDCK细胞中的定位[D];郑州大学;2010年
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6 刘莉;HSV-2 gD模拟抗原表位、IL-18重组核酸疫苗的构建及免疫效果观察[D];泰山医学院;2010年
7 李国庆;重组HIV-1 Vif 158的表达、复性与纯化研究[D];西北大学;2011年
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9 李争明;激光光镊拉曼系统中高葡萄糖对NIT-1细胞凋亡影响的研究[D];广西医科大学;2011年
10 王敏;内源性硫化氢对柯萨奇病毒B_3性心肌炎小鼠心肌内病毒复制的影响[D];广西医科大学;2011年
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6 师志海;张敦伟;李守军;;H3N2亚型犬流感病毒NS1基因的原核表达[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
7 李西玉;许信刚;周继章;邱昌庆;曹小安;宫晓炜;王光华;;猪流产嗜性衣原体MOMP基因的克隆及原核表达[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
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3 张淑华;心肌型脂肪酸结合蛋白的原核表达与应用研究[D];吉林大学;2006年
4 王云珑;拟南芥Athspr突变体的耐热性分析及Athspr基因的原核表达[D];兰州大学;2010年
5 李会娟;家蚕转胶蛋白基因的原核表达及功能的初步研究[D];浙江理工大学;2010年
6 王力;金丝桃素合成酶的基因克隆、表达及其酶学性质研究[D];中国农业大学;2005年
7 李河林;IBRV XA株的分离鉴定及其gD蛋白的原核表达[D];西北农林科技大学;2010年
8 罗丹丹;鸭瘟病毒UL47基因转录时相分析及主要抗原域的原核表达和抗体制备[D];四川农业大学;2010年
9 刘润先;维生素A结合蛋白基因的克隆及原核表达[D];内蒙古农业大学;2003年
10 李正平;猪流感病毒H_3N_8亚型NA基因的克隆和原核表达及间接ELISA方法的建立[D];华中农业大学;2010年
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