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《中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集》2010年
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猪肺炎支原体黏附因子抗原表位片段的克隆与序列分析

喻翠翠  孟宪荣  栗绍文  梅仕林  张望  周蕾蕾  陈辉  毕丁仁  
【摘要】:本研究的目的在于利用重组猪结合珠蛋白(Haptoglobin,Hp)制备特异性单克隆抗体。方法是以梅山猪肝脏总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增猪hp基因,将其克隆到原核表达载体pGEX-KG和pET-32a上,转化至E.coliBL2 1中,IPTG诱导下高效表达重组GST-Hp和HIS-Hp蛋白。用纯化的重组GST-Hp免疫BALB/c小鼠,用纯化的HIS-Hp作为包被抗原进行间接ELISA检测,通过淋巴细胞杂交瘤技术筛选阳性细胞株,制备单克隆抗体。结果表明筛选到2株高效分泌抗猪Hp单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为3B4和3C8。Western-blot和间接ELISA检测均表明制备的单克隆抗体具有良好的特异性。
【作者单位】:华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室
【分类号】:S852.62

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【共引文献】
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