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《中国畜牧兽医学会养猪学分会2009年学术年会“回盛生物”杯全国养猪技术论文大赛论文集》 2009年
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长白猪IL-2基因克隆及真核表达载体的构建

王彬  汤德元  李春燕  曾志勇  黄涛  徐健  张晓杰  王凤  
【摘要】:将长白猪外周血淋巴细胞在刀豆素A(ConA)的刺激下培养24h后,提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增白细胞介素-2(IL-2)cDNA,克隆到pMD19-T载体并测序。将构建好的T载体双酶切并回收目的片段,将回收片段与pcDNA3.1(+)载体连接并转化入TOP10中构建真核表达载体。结果表明:克隆的IL-2 cDNA全长为526个碱基,ORF为465个碱基,编码154个氨基酸,与GenBank公布的猪IL-2比对同源性为100%,从而证实成功克隆了长白猪IL-2 cDNA。真核表达载体双酶切及测序表明成功构建了长白猪IL-2真核表达载体。

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