收藏本站
《中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(上册)》2009年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ基因的表达及其单克隆抗体的制备

孟宪荣  周蕾蕾  栗绍文  周祖涛  毕丁仁  陈辉  齐冰玉  
【摘要】:猪骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ是猪肉所特有的一种蛋白质,可以作为一种耐热种类标志蛋白来区分于其他熟肉制品的肉种类来源。本研究根据TNNI1 cDNA序列(AY282922)设计合成了一对引物TnI-SPI/TnI-SP2,利用RT-PCR方法成功克隆到到猪TnI-S4基因(登录号为EU7327 36),该基因大小为546bp,编码1 87个氨基酸。同时构建了该基因的原核表达载体(pKG-TnI-slow和pET-32a-TnI-slow),在E.coli BL21(DB3)中表达发现表达产物分子量大小为47KD和41KD的蛋白条带,与预期融合蛋白GST-TnI-SLOW和HIS-TnI-SLOW的分子量大小一致。Western-blotting分析进一步表明表达产物GST-TnI-SLOW融合蛋白具有良好的免疫活性。利用纯化的GST-Tnl-SLOW融合蛋白,本研究还制备了抗猪慢骨骼肌亚型肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体,特异性试验表明该单抗对熟猪肉样品显示阳性,而与其它动物肉样品没有明显的交叉反应性。本实验研究结果为今后检测猪肉的夹心ELISA方法的确立奠定了基础。
【作者单位】:华中农业大学动物医学院
【基金】:华中农业大学人才启动项目(52204-07015)
【分类号】:S828

【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘烈刚,刘恭平,姚平,郝丽萍,杨雪峰,孙秀发,朱清华;维生素A缺乏对小鼠胚胎Hox-3.5 mRNA表达与胚胎发育关系的研究[J];癌变.畸变.突变;2003年03期
2 安兰敏,杨军,徐兵;铅对大鼠脑细胞凋亡的诱发作用及对P53基因表达影响的研究[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
3 王欣,褚建新,傅汝林,赵钧铭;清热解毒方对可移植性小鼠淋巴细胞白血病及其微小残留病疗效的比较研究[J];中医药临床杂志;2005年02期
4 赵莉;邓晓玲;蔚应俊;;水稻叶片mRNA差异显示技术中总RNA的提取和检测[J];安徽农业科学;2006年17期
5 詹爱军;王新卫;王宪文;;抗H9亚型AIV血凝素单克隆抗体的制备及亚型鉴定[J];安徽农业科学;2008年03期
6 张海军,张小爱,程双怀,耿红,聂刘旺,阚显照;扬子鳄Sox基因的PCR-SSCP分析[J];安徽师范大学学报(自然科学版);2001年03期
7 陈冬生,聂刘旺,王朝林,谢万树;扬子鳄DMRT1基因DM保守区的克隆及序列分析[J];安徽师范大学学报(自然科学版);2004年04期
8 韩纯;T细胞亚群的分类及其功能进展(综述)[J];安徽卫生职业技术学院学报;2003年03期
9 姜宏,李麓芸,卢光琇;PCR法直接筛选重组阳性克隆[J];安徽医学;2005年02期
10 黄金玲,龙子江,吴华强,王桐生,方义英;苓桂术甘汤对免疫功能低下模型小鼠淋巴细胞活性的影响[J];安徽中医学院学报;2004年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李新民;党琦;;天佛参口服液(TFS)诱导人喉癌细胞Hep-2凋亡及机理探讨[A];2011年中华名中医论坛暨发挥中西医优势防治肿瘤高峰论坛论文集[C];2011年
2 杨彬;兰喜;殷相平;李学瑞;李宝玉;方玉萍;柳纪省;;口蹄疫病毒双效疫苗载体的构建及其体外表达研究[A];第二届全国人畜共患病学术研讨会论文集[C];2008年
3 杨彬;兰喜;殷相平;李学瑞;李宝玉;方玉萍;柳纪省;;口蹄疫病毒双效疫苗载体的构建及其体外表达研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
4 李西玉;许信刚;周继章;邱昌庆;曹小安;宫晓炜;王光华;;猪流产嗜性衣原体MOMP基因的克隆及原核表达[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次学术研讨会论文集[C];2010年
5 赵春玲;顾晓琼;李蔷华;缪湘伊;;保儿增食液对厌食症患儿IL-2及IL-2R的影响[A];第23届全国中医儿科学术研讨会暨儿科名中医讲习班论文汇编[C];2006年
6 刘明珠;许丽绵;;助孕3号方对早期自然流产T淋巴细胞亚群、NK细胞影响的临床研究[A];全国中医妇科第七次学术研讨会论文汇编[C];2007年
7 刘明珠;许丽绵;;助孕3号方对肾虚黄体抑制流产孕鼠T淋巴细胞亚群、Fas/Fasl表达干预的研究[A];全国中医妇科第七次学术研讨会论文汇编[C];2007年
8 赵春玲;缪湘伊;于乐;刘晓青;;保儿增食液对厌食症患儿免疫功能的影响[A];第24届全国中医儿科学术研讨会、中医药高等教育儿科教学研讨会、儿科名中医讲习班论文汇编[C];2007年
9 何学斌;薛存宽;陈艳雯;许明旺;沈凯;蒋鹏;李颖;曾伶;;啤酒酵母RNA对小鼠免疫功能的影响[A];药用植物化学与中药资源可持续发展学术研讨会论文集(上)[C];2009年
10 何学斌;薛存宽;陈艳雯;许明旺;沈凯;蒋鹏;李颖;曾伶;;啤酒酵母RNA对小鼠免疫功能的影响[A];第二届中草药提取关键技术与提取物产业应用研讨会论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吴异健;两种中药多糖对呼肠孤病毒感染番鸭的免疫调节作用[D];福建农林大学;2010年
2 朱丽君;重症肌无力动物模型的建立及中药治疗重症肌无力的机制研究[D];吉林大学;2011年
3 乔小放;RNA干扰SUMO1基因对结肠癌Hct116细胞生物学行为的影响[D];吉林大学;2011年
4 孙娟;艾灸神阙穴配合温针灸治疗原发性痛经的临床及实验研究[D];广州中医药大学;2011年
5 管笛;黄曲霉毒素M_1单克隆抗体及检测技术研究[D];中国农业科学院;2011年
6 朱伟;摄食抑制因子NUCB2/Nesfatin-1对机体胰岛素敏感性的影响[D];重庆医科大学;2011年
7 钟朝晖;中国东南部地区男性人群体力活动与前列腺癌之相关性研究[D];中南大学;2011年
8 范鑫;奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌亚单位疫苗的研究[D];内蒙古农业大学;2011年
9 朱静媛;志贺菌属细菌整合子与多重耐药性研究[D];郑州大学;2010年
10 陈超;金欣口服液调节RSV感染模型TNF-αmRNA、SIgA表达及干预融合病变的实验研究[D];南京中医药大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年
2 王翠;杜氏盐藻寡糖基转移酶亚基STT3a的基因克隆与功能分析[D];郑州大学;2010年
3 陆玉成;AMF基因在食管鳞癌细胞株中的表达及功能初步分析[D];郑州大学;2010年
4 张磊;杜氏盐藻(Dunaliella salina)GPI多克隆抗体的制备及其在MDCK细胞中的定位[D];郑州大学;2010年
5 冯玖玲;杜氏盐藻RbcS基因家族新成员的克隆及功能研究[D];郑州大学;2010年
6 刘莉;HSV-2 gD模拟抗原表位、IL-18重组核酸疫苗的构建及免疫效果观察[D];泰山医学院;2010年
7 陈艳;滋肾调周法分期治疗青春期肾阴虚兼瘀热型无排卵性功血的临床研究[D];山东中医药大学;2010年
8 许兰兰;归术调经汤治疗肥胖型月经过少的临床研究[D];山东中医药大学;2010年
9 李秀美;逍遥舒坤汤治疗气滞血瘀型慢性盆腔炎的临床研究[D];山东中医药大学;2009年
10 周群;反复自然流产与中医体质学的相关性研究[D];成都中医药大学;2010年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郭秀礼;李燕珠;孟庆钧;马跃杰;王玉金;陈兴业;;抗孕酮单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立[J];河南科学;1987年04期
2 蒋玉文;;体外大规模生产单克隆抗体的研究现状[J];中国预防兽医学报;1988年05期
3 赵建中;刘环;马从林;邓定华;;单克隆抗体对鼻疽和类鼻疽病原抗原及其血清学鉴别诊断的实验研究[J];微生物学报;1990年01期
4 李丹丹;张馨心;赵立平;相文华;;猪戊型肝炎病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析[J];动物医学进展;2008年04期
5 李永亮;杨苏珍;田美娜;卢曾军;刘在新;;单克隆抗体在畜禽病毒性传染病研究中的应用[J];生物技术通报;2009年01期
6 ;单克隆抗体[J];中国生物工程杂志;1983年04期
7 宋耀彬;淋巴细胞杂交瘤技术及单克隆抗体(续)[J];中国兽医科技;1984年06期
8 欧阳琨;;单克隆抗体在兽医和畜牧中的研究现状与展望[J];西北农林科技大学学报(自然科学版);1985年03期
9 江扬;;抗大肠埃希氏菌K_(99)和987P粘着素单克隆抗体研究进展[J];扬州大学学报(农业与生命科学版);1986年04期
10 张如宽;甘军纪;刘秀梵;;抗沙门氏菌O_4、O_(12)抗原特异单克隆抗体的产生及其特性鉴定[J];扬州大学学报(农业与生命科学版);1988年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘振勇;邓国华;李呈军;张立春;田国彬;何后军;于康震;陈化兰;;抗禽流感H9N2亚型血凝素特异性单克隆抗体的制备与分析[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
2 华芳;雷连成;王丽哲;韩文瑜;;猪胸膜肺炎放线杆菌单克隆抗体杂交瘤株的建立[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
3 刘健宏;王标;庄向生;王长兵;周伦江;刘玉涛;;单克隆抗体与免疫荧光染色技术[A];福建省科协首届学术年会卫星会议——畜牧业持续发展对策学术研讨会论文集[C];2001年
4 魏莹;盖新娜;贾红;郭鑫;杨汉春;;猪脑心肌炎病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及其识别表位分析[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
5 胡茂志;焦新安;潘志明;黄金林;邵国青;刘秀梵;;抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[A];人畜共患传染病防治研究新成果汇编[C];2004年
6 黄红亮;陈焕春;陈美玲;贝为成;严琳;;胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ基因3’-端的克隆、原核表达及单克隆抗体的制备[A];湖北省生物工程学会2004年年会学术报告及论文摘要汇编[C];2004年
7 黄红亮;陈焕春;陈美玲;贝为成;严琳;;胸膜肺炎放线杆菌毒素Ⅳ基因3'-端的克隆、原核表达及单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集(下册)[C];2004年
8 高士争;张玉静;郝军元;;抗猪脂肪细胞特异膜蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年
9 夏兴霞;刘洁;王永山;诸玉梅;欧阳伟;何孔旺;张雪寒;;动物源性人兽共患细菌病防控生物新制剂的研究 Ⅰ.分泌抗大肠杆菌0157:H7单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集(下册)[C];2009年
10 马健男;杨涛;徐青元;孙恩成;林燕;步志高;吴东来;;西尼罗病毒NS1蛋白特异性单克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第八次学术研讨会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张忠霞;禽流感防治研究获新进展[N];人民日报;2007年
2 河北远征药业 秦建华;猪细小病毒病诊断与预防[N];中国畜牧兽医报;2006年
3 ;我国首次发现不受病毒变异影响的禽流感抗体[N];中国畜牧兽医报;2007年
4 成明烈;鸡传染性法氏囊病综合防治技术产品研制成功[N];中国贸易报;2000年
5 中国农业大学 查红波;猪的牛病毒性腹泻病毒感染[N];中国畜牧兽医报;2005年
6 记者 董映璧;俄可快速识别植物黄矮态病毒[N];科技日报;2005年
7 郝继林;犬的细小病毒病[N];中国畜牧兽医报;2007年
8 张晓鹏 何秀丽;哈兽研构建起“猪蓝耳病”预防控制平台[N];中国畜牧兽医报;2008年
9 本报记者;我省治疗禽流感科研取得国际性重大突破[N];福建科技报;2007年
10 本报记者;我省治疗禽流感科研取得国际性大突破[N];福建日报;2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李宝全;H9亚型禽流感病毒抗独特型抗体的研制与其免疫原性的初步分析[D];山东农业大学;2005年
2 穆杨;MATSA的分离纯化及其单克隆抗体的研制[D];西北农林科技大学;2005年
3 徐佳;鸡传染性支气管炎病毒核蛋白抗原表位鉴定与单链抗体初步研究[D];中国农业科学院;2009年
4 覃雅丽;猪伪狂犬病鉴别诊断方法的研究及单克隆抗体的制备[D];华中农业大学;2002年
5 艾永兴;鸡p15~(INK4B)基因的克隆表达及其作用的研究[D];吉林大学;2006年
6 苏建青;犬瘟热免疫层析试纸及荧光定量PCR诊断方法的建立与评价[D];吉林大学;2008年
7 赵银丽;恩诺沙星残留免疫学快速检测技术研究[D];西北农林科技大学;2009年
8 邱玉玉;A亚群禽白血病病毒单克隆抗体的制备和不同亚群禽白血病病毒共感染相互影响的研究[D];山东农业大学;2011年
9 马亮;弓形虫表面抗原SAG3单克隆抗体的制备及应用研究[D];吉林大学;2012年
10 石建平;牛传染性鼻气管炎(IBR)快速筛查方法的建立及应用[D];吉林大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郑杰;分泌抗猪流感病毒(河南株)单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备、鉴定和初步应用[D];河南农业大学;2004年
2 邵炜慧;盐酸克伦特罗单克隆抗体的研制及初步应用[D];扬州大学;2005年
3 王雨晨;伏马毒素B_1单克隆抗体的制备及多种免疫学检测方法的建立[D];上海交通大学;2011年
4 冯树梅;抗猪囊尾蚴单克隆抗体的制备及鉴定[D];新疆农业大学;2001年
5 姚建聪;猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4株GP5单克隆抗体的研制[D];中国农业大学;2004年
6 王宏飞;抗克伦特罗单克隆抗体的研制及其检测试剂盒的初步应用[D];扬州大学;2004年
7 李瑞芳;抗BovIFN-gamma特异性单克隆抗体的研制及其特性[D];扬州大学;2004年
8 王彤光;犬细小病毒单克隆抗体在治疗犬细小病毒病上的应用研究[D];西北农林科技大学;2003年
9 戴小华;雌二醇单克隆抗体的制备与酶联免疫检测试剂盒的初步研究[D];新疆农业大学;2005年
10 靳岷;猪肺炎支原体单克隆抗体的制备与初步鉴定[D];山西农业大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026