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《首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)》2008年
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人溶菌酶基因在大肠杆菌中的融合表达及其生物学活性的研究

欧阳萍  雷连成  吕爽  韩文瑜  
【摘要】:为了研究一种高效可溶表达有活性人溶菌酶的方法,将人溶菌酶基因克隆到带有GST融合标签的原核表达载体pGEX-4T-1上,转化至大肠杆菌BL21(DE_3)中,筛选得到的阳性克隆用IPTG进行诱导,SDS-PAGE电泳显示在大约40KD处有特异的蛋白条带出现,Western-blotting检测表明已经成功表达了人溶菌酶融合蛋白,亲和层析纯化得到的融合蛋白,采用溶壁微球菌比浊法测定了酶活性为2389U/mg,体外抑菌实验结果表明重组人溶菌酶对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌有一定程度的抑菌作用。结论:成功的构建了人溶菌酶的原核表达载体,并表达出了有活性的重组人溶菌酶。
【作者单位】:吉林大学农学部畜牧兽医学院
【分类号】:Q78

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 叶军,钱世钧;工程菌人溶菌酶的纯化和性质[J];微生物学报;1999年01期
2 钱世钧,陈欣,叶军,郭良栋,郭伟;从大肠杆菌包含体中提取有活性的人溶菌酶的研究[J];生物工程学报;1996年S1期
3 矫庆华,钱世钧,叶军,郭伟;人工合成人溶菌酶基因在大肠杆菌中表达[J];生物工程学报;1997年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 曹佳,曹阳,许丽苹,刘良式,卓鉴波,候永敏;λDNA体外重包装法进行化学诱变的初步研究[J];癌变.畸变.突变;1991年04期
2 陈士友,张兹钧,金由辛,陈溥言,蔡宝祥,王德宝;传染性法氏囊病病毒cDNA文库的构建[J];病毒学报;1994年02期
3 刘剑剀,洪敏,李小林;人参皂甙对老龄化大鼠心房肽基因表达的影响[J];吉林大学学报(医学版);1992年02期
4 龙铟,刘家云,刘莉,王宗仁;水蛭素基因毕赤酵母表达载体的构建及高拷贝稳定整合菌株的筛选[J];第四军医大学学报;2004年13期
5 梁凤霞,丁明孝,翟中和;应用电镜原位杂交技术与免疫标记技术研究膀胱上皮细胞的分化[J];电子显微学报;1994年04期
6 牛青山,辛阳,张璐,郑吉龙,林子清;微量检材DNA提取方法[J];中国法医学杂志;2005年02期
7 吴晓英,林影,陈慧英;溶菌酶的研究进展[J];工业微生物;2002年04期
8 沈骅,王晓蓉,张景飞,刘慧,赵永娟;Cu~(2+)和Cu-EDTA对鲫鱼脑组织应激蛋白HSP70诱导的影响[J];环境科学;2004年03期
9 沈骅,王晓蓉,张景飞,刘晓华,赵永娟;低浓度Pb~(2+)、Cd~(2+)对鲫鱼肝脏组织中HSP70诱导的影响[J];环境污染与防治;2004年04期
10 朱旗,任春梅,洪亚辉,罗军武;茶树叶片DNA提取、纯化与检测[J];湖南农业大学学报;1994年02期
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 王颖;天然食品防腐剂人溶菌酶编码基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[D];中国农业大学;2003年
2 彭远义;植酸酶产生菌的选育及高表达工程菌的构建研究[D];西南农业大学;2004年
3 戴芳;人骨保护素cDNA的克隆与表达[D];天津医科大学;2004年
4 李国才;人溶菌酶动物乳腺生物反应器的研制[D];扬州大学;2004年
5 程卫青;大鼠抗汉滩病毒单抗可变区基因的克隆、测序和人—大鼠嵌合抗体的表达及ScFv基因构建的研究[D];第四军医大学;1994年
6 陈筠;牙髓碱性磷酸酶的提纯、cDNA克隆和氢氧化钙对其活性、表达的影响[D];第四军医大学;1991年
7 金春峰;环境内分泌干扰物对肝细胞VTG及HSP-70诱导的实验研究[D];辽宁中医药大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨水英;重庆稻瘟病菌的遗传谱系及其与致病性的关系研究[D];西南农业大学;2002年
2 余小红;海栖热袍菌和重组毕赤酵母发酵产极耐高温木聚糖酶及酶的化学修饰[D];中国农业大学;2004年
3 赵红玲;利用毕赤酵母发酵表达植物甜蛋白(Brazzein)的初步研究[D];北京化工大学;2004年
4 李军;利用转基因毕赤酵母高表达重组人胰岛素[D];北京化工大学;2003年
5 朱秋菊;鸡输卵管暂态生物反应器表达人溶菌酶的研究[D];扬州大学;2005年
6 张伟;重组克痛宁在巴斯德毕赤酵母中的表达[D];北京化工大学;2005年
7 宋晓飞;N,O-二乙酰胞壁质酶R2基因的克隆及在枯草杆菌和毕赤酵母中的表达[D];山东大学;2005年
8 张晓东;灰色链霉菌RX-17溶菌酶基因文库的构建及筛选[D];山东大学;2005年
9 陈晶晶;巴斯德毕赤酵母发酵生产重组人溶菌酶研究[D];北京化工大学;2006年
10 何小宁;人溶菌酶基因乳腺特异性表达载体的构建及其在小鼠乳腺癌细胞中的表达[D];西北农林科技大学;2006年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 张智清,姚立红,侯云德;含P_RP_L启动子的原核高效表达载体的组建及其应用[J];病毒学报;1990年02期
2 钱世钧,陈欣,叶军,郭良栋,郭伟;从大肠杆菌包含体中提取有活性的人溶菌酶的研究[J];生物工程学报;1996年S1期
3 矫庆华,钱世钧,叶军,郭伟;人工合成人溶菌酶基因在大肠杆菌中表达[J];生物工程学报;1997年01期
4 郭良栋,钱世钧,叶军,矫庆华;人溶菌酶工程菌株培养条件的研究[J];微生物学报;1997年01期
【相似文献】
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1 郭勇;永井和夫;田村学造;;二环素对大肠杆菌蛋白质合成的选择性作用[J];微生物学报;1982年01期
2 云溪;纤维单胞菌fimi的纤维素酶基因在大肠杆菌中分子克隆(重组DNA:pBR322质粒;免疫检测)[J];中国生物工程杂志;1984年01期
3 ;基因工程[J];生物技术通报;1985年02期
4 ;疫苗[J];生物技术通报;1985年11期
5 ;基因工程[J];生物技术通报;1985年12期
6 ;基因工程[J];生物技术通报;1986年01期
7 陈永青;;大肠杆菌DNA复制起始点(oric)与12KD膜蛋白的结合特性[J];生物化学与生物物理进展;1986年02期
8 ;基因工程[J];生物技术通报;1986年10期
9 ;疫苗[J];生物技术通报;1987年06期
10 魏燕玲,张意仲,黄上媛,徐国洲,王红旗,刘建刚;单克隆抗体ELISA检测产毒大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)的应用研究[J];中国人兽共患病杂志;1988年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 欧阳萍;雷连成;吕爽;韩文瑜;;人溶菌酶基因在大肠杆菌中的融合表达及其生物学活性的研究[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
2 王鹏雁;陈创夫;张再超;毛志福;任艳;;表达大肠杆菌K88ac-STⅡ的口服沙门氏菌活苗的动物免疫试验[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十六次学术研讨会、中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十五次学术研讨会论文集[C];2009年
3 杨海华;;肉鸡支原体与大肠杆菌混合感染病例的综合诊治[A];“科技进步推进畜牧业现代化”科技论文集[C];2011年
4 杨玲丽;陈杖榴;;相同耐药谱大肠杆菌的脉冲场电泳分型研究[A];全国首届动物生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
5 覃宗华;谢明权;蔡建平;艾哈迈德;彭新宇;魏文康;吴惠贤;;毒害艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因在大肠杆菌的表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
6 孙伟;潘石;李银丽;宋林峰;张毅;吴世法;;大肠杆菌与副流感病毒样品的原子力显微镜成像研究[A];大珩先生九十华诞文集暨中国光学学会2004年学术大会论文集[C];2004年
7 赵姗姗;张桂荣;于艳辉;张忆华;;头孢他啶诱导大肠杆菌内毒素释放的研究[A];中国化学会第十三届有机分析与生物分析学术会议论文集[C];2005年
8 刘昀;李冉辉;郑易之;;大豆PM2(LEA3)蛋白及22-氨基酸结构域在植物和大肠杆菌中的耐盐功能鉴定[A];2006年中国植物逆境生理生态与分子生物学学术研讨会论文摘要汇编[C];2006年
9 王小娟;陈向东;;属间细菌质粒自然遗传转化[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
10 许金俊;陶建平;彭金彪;王留;;柔嫩艾美耳球虫YZ株SO7基因在大肠杆菌中的高效表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者  陈超;大肠杆菌有望制成生物微型马达[N];科技日报;2006年
2 裴那;Oxoid公司推出快速确认食品中大肠杆菌的方法[N];中国医药报;2009年
3 沧州河间市畜牧水产局 程红利;一例肉鸡类巴氏杆菌和大肠杆菌混感的诊治[N];河北农民报;2011年
4 ;杆菌速灭[N];中国畜牧水产报;2001年
5 陈勇;菠菜生菜相继被“毒”,灌溉水是“凶嫌”[N];新华每日电讯;2006年
6 编译 王金元;新型相机用大肠杆菌做底片[N];北京科技报;2005年
7 记者 冯卫东;除菌香皂其实并不除菌[N];科技日报;2007年
8 冯立中;致泻大肠杆菌是腹泻病祸首[N];健康报;2006年
9 宁夏隆德县畜牧兽医站 罗志轶;中西医治疗獭兔球虫和大肠杆菌混合感染[N];江苏农业科技报;2007年
10 赵承渊 北京大学第一医院;“怪病”频出:医学昌明的代价?[N];大众科技报;2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 姜中其;仔猪断奶腹泻性大肠杆菌的多重耐药性、毒力因子分布及特异性蛋黄抗体药效的研究[D];浙江大学;2009年
2 王倩;聚羟基脂肪酸酯在大肠杆菌中的合成、降解以及分子改造[D];山东大学;2009年
3 郑宗宝;一体化生物加工过程进行大肠杆菌的半纤维素琥珀酸生产[D];天津大学;2012年
4 康振;大肠杆菌系统改造及琥珀酸和5-氨基乙酰丙酸合成途径的构建[D];山东大学;2011年
5 王颖;天然食品防腐剂人溶菌酶编码基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[D];中国农业大学;2003年
6 孙凤军;大肠杆菌生物膜的形成及其耐药质粒传递和调控的研究[D];第三军医大学;2009年
7 李晓敏;大肠杆菌氧胁迫适应性蛋白质组学、O-抗原研究和嗜热菌NG80-2醛脱氢酶分子生物学研究[D];南开大学;2010年
8 李丹;尿道致病性大肠杆菌进化机制的研究及检测方法的确立[D];南开大学;2010年
9 彭亮;聚磷酸盐激酶1在脑膜炎大肠杆菌K1株致病中的相关功能研究[D];南方医科大学;2011年
10 马毅;多个药物靶标蛋白在大肠杆菌无细胞系统高效表达及功能表征[D];华南理工大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 代彩霞;人溶菌酶蛋白的原核表达、纯化及生物活性检测[D];暨南大学;2012年
2 王晓强;血小板反应素1活性cDNA片段的克隆与表达[D];四川大学;2005年
3 周璇;重组人IZ-CD40L在大肠杆菌中的高效表达和生物学活性的鉴定[D];苏州大学;2005年
4 张建军;大肠杆菌F18菌毛操纵子fed基因的克隆、表达及其生物活性的初步研究[D];扬州大学;2005年
5 涂健;抗生素和内毒素诱发鸡肠源性大肠杆菌易位的实验研究[D];安徽农业大学;2005年
6 王雷;致断奶仔猪腹泻、水肿病大肠杆菌F18菌毛a、b、c因子单克隆抗体的研制及初步应用[D];扬州大学;2005年
7 许攀峰;头孢他啶对家兔产CTX-M-14型ESBLs细菌性腹膜炎的治疗作用[D];浙江大学;2005年
8 汪洋;携带IBV基因重组质粒的大肠杆菌发酵及提取工艺研究[D];四川农业大学;2005年
9 刘变芳;果蝇抗菌肽基因Andropin在大肠杆菌中的克隆与融合表达[D];西北农林科技大学;2005年
10 陈淼;HChEGF在原核和真核中的高效表达及应用研究[D];苏州大学;2005年
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