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《第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛论文集(下册)》2008年
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齐口裂腹鱼生长激素成熟肽基因的克隆和原核表达研究

林涛  颜其贵  冯迎春  冯婷  
【摘要】:运用 RT-PCR 技术,首次从齐口裂腹鱼(Schizthorax prenanti)脑垂体扩增出生长激素(growth hormone,GH)完整开放阅读框(ORF),共633 bp,编码210 aa。分子进化分析表明其与草鱼和鲤鱼 GH 的进化关系较近,而与人类的 GH 基因进化距离较远。运用 PCR 技术从含齐口裂腹鱼 GH 开放阅读框序列质粒中扩增其成熟蛋白编码基因,共564 bp。将其定向克隆于原核表达载体 pET-32a(+) 后在 E.coli BL21中诱导表达,SDS-PAGE 结果显示表达的融合蛋白约为41 kD,重组蛋白以包涵体形式表达,表达产物约占菌体总蛋白的42.6%。齐口裂腹鱼 GH 成熟肽成功在体外获得高效表达,为齐口裂腹鱼的保护积累了一定理论依据。

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