收藏本站
《中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集》2006年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

中国白兔白介素-10基因的克隆、表达及其多克隆抗体的制备

孟庆玲  才学鹏  乔军  景志忠  张艳  田广孚  郭爱疆  
【摘要】:运用RT-PCR对用ConA刺激的中国白兔外周血淋巴细胞(PMBCr)进行了扩增,将纯化后的PCR 产物克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定,并与不同物种的IL-10基因进行了序列比较.结果该基因全长537bp,编码178个氨基酸,其中前18个氨基酸残基构成信号肽序列.与GenBank报道的欧洲兔IL-10 基因相比,核苷酸的同源性为99.63%,氨基酸的同源性为99.44%,但与鼠,鸡、河豚和斑马鱼等不同物种IL-10相比差异较大.在推导的中国白兔IL-10氨基酸序列中,在100-102和134-136位存在2个潜在的 N-联糖基化位点,同时存在6个Cys残基.将pTIL-10双酶切,回收目的基因片段克隆到pET28a中构建了重组质粒pETIL-10,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行了诱导.结果重组菌菌体裂解物经 SDS-PAGE电泳可检测到相对分子量为23.4kDa的重组目的蛋白.经凝胶薄层扫描,目的蛋白表达量可占菌体蛋白的15.2%.将表达的蛋白割胶纯化后,制备了小鼠抗兔IL-10的多克隆抗体.

手机知网App
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 唐宇龙;刘湘新;杨华;丁元生;胡忠义;;结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6融合基因的表达及其多克隆抗体的制备[J];中国兽医科学;2006年10期
2 曾岩;任晓峰;蔡皓璠;牛泽;李广兴;;鸡γ-干扰素基因原核表达及多抗血清的制备[J];中国家禽;2010年01期
3 孟庆玲;才学鹏;乔军;景志忠;张艳;田广孚;郭爱疆;;中国白兔白介素-10基因的克隆、表达及其抗体的制备[J];中国实验动物学报;2007年03期
4 王永山;范红结;张晓民;李银;肖焕娟;;传染性法氏囊病病毒多表位模拟肽串联基因的表达与免疫原性分析[J];微生物学报;2007年01期
5 杨松涛;夏咸柱;乔军;王铁成;郑明光;常爽;黄耕;苏建青;冯娜;王化磊;;虎源猫瘟热病毒VP2蛋白基因在毕赤酵母中的表达[J];微生物学通报;2006年01期
6 丁家波,崔治中,韦平,卢银华,赵文明,韩凌霞,吉荣;马立克氏病病毒广西株G2囊膜糖蛋白gI基因的克隆和表达[J];中国兽医学报;2001年02期
7 严维巍,崔治中,王永坤;中国株兔出血症病毒衣壳蛋白VP60基因在大肠杆菌中的表达及其免疫原性鉴定[J];中国兽医学报;2003年05期
8 许金俊,秦爱建,刘岳龙,金文杰,李瑞芳;奶牛γ-干扰素基因克隆及其在大肠杆菌中表达[J];扬州大学学报(农业与生命科学版);2003年01期
9 许发芝,仲大莲,刘玉华,余为一,李槿年,曾明华;鸡IL-2基因克隆及其重组质粒的构建与表达[J];安徽农业大学学报;2004年01期
10 张书霞,陈万芳,于勇,鲍恩东;bcl-2基因在成年和胚胎鸡免疫器官中的表达及其与细胞凋亡的关系[J];南京农业大学学报;1999年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 孟庆玲;才学鹏;乔军;景志忠;张艳;田广孚;郭爱疆;;中国白兔白介素-10基因的克隆、表达及其多克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集[C];2006年
2 孟庆玲;才学鹏;乔军;景志忠;张艳;田广孚;郭爱疆;;中国白兔白介素-10基因的克隆、表达及其多克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(上册)[C];2006年
3 刘文博;陈媛媛;李德朋;付云贺;张乃生;郭梦尧;杨正涛;;奶牛黏附分子MadCam-1基因的克隆及原核表达[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(下册)[C];2011年
4 杨松涛;夏咸柱;乔军;王铁成;常爽;黄耕;;虎源猫泛白细胞减少症病毒VP2基因在毕赤酵母中的表达[A];第十一次全国养犬学术研讨会论文集[C];2005年
5 马红霞;丛薇;陈丽芳;刘玉堂;;临床分离动物源性大肠杆菌多重耐药调控基因marA表达水平的测定[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十次研讨会论文摘要集[C];2009年
6 沈红;吴国娟;李焕荣;郭振泉;;高分子控温相变免疫分析测定氨苯磺胺[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第九次学术讨论会论文与摘要集[C];2006年
7 高富红;戴小华;沈红;吴国娟;;雌二醇人工抗原的合成及多克隆抗体的制备[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第九次学术讨论会论文与摘要集[C];2006年
8 郭玮;裴兆柱;王星星;吴国娟;;磺胺母核抗原合成及多克隆抗体的制备[A];京津冀畜牧兽医科技创新交流会暨新思想、新观点、新方法论坛论文集[C];2008年
9 李鹏;崔玉苍;李凯伦;周斌;曹瑞兵;陈溥言;;猪繁殖与呼吸综合征病毒河北地方株GF11O7株ORF7基因的克隆与序列分析[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(上)[C];2005年
10 韩德强;丁宏标;乔宇;索勋;郝永清;;柔嫩艾美耳球虫表面抗原基因sag10在Pichia pastoris中的表达及鉴定[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 记者 孟海星;快速检测瘦肉精试剂盒问世[N];农民日报;2004年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郜玉钢;鹿源BVDV分离鉴定、E_0基因的克隆与表达及免疫原性研究[D];吉林农业大学;2005年
2 彭其胜;IL-10_(23-57)-PE40免疫毒素的制备及细胞毒活性研究[D];吉林大学;2005年
3 王海燕;荧光假单孢菌脂肪酶基因的克隆、改造及其在毕赤酵母中的表达[D];中国农业科学院;2006年
4 贾艳;猪源肺炎克雷伯菌菌毛致病的分子基础及其免疫相关抗原表位的筛选[D];吉林大学;2007年
5 王冬梅;口蹄疫病毒VP1及多抗原表位基因在植物表达的研究[D];华南热带农业大学;2007年
6 姜飞;前列腺癌小鼠模型差异表达基因的筛选及TRIM59基因功能的初步研究[D];西北农林科技大学;2009年
7 徐高原;猪乙型脑炎与伪狂犬病二价基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2005年
8 徐德全;猪背最长肌差异表达基因的克隆鉴定及其特征分析[D];华中农业大学;2005年
9 琚春梅;猪2型圆环病毒ELISA诊断方法及猪2型圆环病毒-伪狂犬病病毒二价基因工程疫苗研究[D];华中农业大学;2005年
10 高明华;狂犬病毒G,N基因的表达、单克隆抗体制备与胶体金免疫层析检测试纸的研制[D];吉林大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 侯秋莲;鹅细小病毒VP2基因片段在原核系统中的表达及多克隆抗体的制备[D];新疆农业大学;2005年
2 顾小龙;堆型艾美耳球虫单链抗体-PE40重组毒素构建及活性研究[D];河北农业大学;2006年
3 夏青娟;猪生长激素单克隆抗体的制备及应用[D];吉林农业大学;2006年
4 潘龙;鸡堆型艾美耳球虫3-1E基因的原核表达及多克隆抗体制备[D];东北农业大学;2008年
5 宋海龙;猪生长激素ELISA检测体系的建立和应用[D];吉林农业大学;2008年
6 刘向辉;洛美沙星和阿莫西林多克隆抗体的制备及Ci-ELISA检测方法的初步研究[D];郑州大学;2006年
7 舒文祥;鸡免疫球蛋白的分离纯化及其ELISA检测方法的建立[D];安徽农业大学;2007年
8 刘建静;氯丙嗪酶联免疫检测方法(ELISA)的建立[D];中国农业科学院;2009年
9 马伟;庆大霉素免疫分析新方法的研究[D];江南大学;2009年
10 张景艳;喹乙醇酶联免疫分析方法研究[D];甘肃农业大学;2009年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026