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《中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会第六届代表大会论文集》2006年
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金黄色葡萄球菌β-溶血毒素基因的克隆与原核表达

李冬野  侯喜林  朴范泽  
【摘要】:应用多聚酶链式反应(PCR)技术,从本试验室保存的金黄色葡萄球菌菌种S10中提取DNA,扩增到全长982 bp金黄色葡萄球菌β溶血毒素基因(hIb),将该基因克隆到PMD-T载体,测序结果表明, 该基因为不舍终止密码子的目的基因.将该目的基因克隆到原核表达栽体PET-32a,获得重组质粒PET-32a-β经酶切、PCR及序列测定,表明hlb基因插入的位点、大小与读码框均正确.PE-32a-β在大肠杆菌BL21 (DE3)中经IPTG诱导,表达产物经SDS-PAGE电泳分析,在57kD处出现一条蛋白带,表明所克隆的 hlb基因在大肠杆菌中得到良好的表达,为进一步研究hlb的生物学特性奠定了基础.

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