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《中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集》2006年
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柔嫩艾美耳球虫5401基因的克隆、序列分析及原核表达

黄欣梅  徐立新  严若峰  李祥瑞  
【摘要】:分别以孢子化卵囊及第二代裂殖子为材料,应用RT-PCR技术克隆了柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)5401基因。测序结果表明该基因序列全长为864bp,序列本身是一个开放阅读框。将克隆得到的基因与国外报道的5401基因比较,第174位和第287位发生突变,碱基分别由T突变为C,由C突变为T.第一个为无义突变,第二个突变引起第96位氨基酸由A变为V.其核苷酸序列同源性为99.8%,氨基酸同源性为99. 7%。将5401基因克隆到pGEX-4T-2获得重组质粒pGEX-4T-2-5401,转入宿主菌BL21中,用IPTG进行诱导表达,表达的融合蛋白约90 kd。

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