猪白介素家族重要基因的克隆、表达及其结构与功能预测分析
【摘要】:白介素(interteukin,IL)是由单核-巨噬细胞及淋巴细胞经激活后转录表达和分泌的一类小分子多肽的生物活性物质,在机体免疫应答、炎症反应以及抗感染等方面具有重要功能,是机体的主要细胞因子之一。本研究以猪白介素基因家族为对象,通过对猪PBMC刺激诱导,提取RNA,采用RT-PCR技术克隆了IL-4、IL-6、IL-18等重要功能基因,并成功地进行了原核表达和结构与功能预测。经序列分析发现,克隆的基因与NCBI/GenBank上登载的参考序列的同源性分别为99.25%、99.21%和100%,与其他各物种的基因及其编码蛋白间具有较大的种属差异性。结构预测表明,这些蛋白分子均含有较多的磷酸化修饰、糖基化修饰(除IL-6)、蛋白激酶以及信号传导结合位点,其中IL-4、IL-6蛋白分子的螺旋化程度较高,均在60%左右,水溶性较低,但这三种蛋白的立体空间结构均为致密的球状,该结构特征为其发挥多种生物学功能奠定了基础。
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