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《第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会——2005中国畜牧兽医学会学术年会论文集》2005年
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猪瘟病毒E2蛋白抗原单表位基因的融合表达及其免疫活性的研究

刘思国  涂长春  余兴龙  张茂林  刘伯华  吴健敏  
【摘要】:利用基因搭桥技术,在Klenow DNA聚合酶作用下,分别合成猪瘟病毒E2蛋白的3个抗原表位基因,并与原核表达栽体pGEX-3X进行连接、转化和筛选鉴定,构建了3个重组质粒pGEX-C、pGEX-D和pGEX-E。在IPTG的诱导下,实现了可溶性蛋白的融合表达(GST-C、GST-D、GST-E),以GST亲和层析柱对融合蛋白进行纯化。应用ELISA和Western-blot检测证实:E抗原表位基因表达的融合蛋白GST-E具有免疫学活性,而C和D的抗原表位基因虽然都表达了融合蛋白GST-C和GST-D,但未检测到免疫学活性。免疫攻毒保护试验表明:融合蛋白GST-E具有一定的免疫保护功能,这为多表位疫苗的研究奠定了基础。

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