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《中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集》2004年
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毒害艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因在大肠杆菌的表达

覃宗华  谢明权  蔡建平  艾哈迈德  彭新宇  魏文康  吴惠贤  
【摘要】:根据我们首次克隆的毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)广东株微线蛋白质-2基因(EnMIC-2(Gd))的cDNA 序列设计特异性引物,用PCR 方法扩增其阅读框架(ORF)后克隆至质粒表达戟体pET-32a(+),成功构建了重组表达质粒pET-32a(+)-EnMIC-2,用CaCl_2法将其转化至宿主细菌E.coli BL21(DE3)。并用IPTG 成功诱导了EnMIC-2 重组抗原在大肠杆菌的表达,表达的重组蛋白约占茵体总蛋白的10.8%,其分子量大小约为55kDa。重组蛋白经SDS-PAGE 分析后,用E.necatrix(广东株)感染鸡的高免血清进行Western Blotting 分析,结果为阳性。

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