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抗猪脂肪细胞特异膜蛋白scFv噬菌体抗体库的构建及可溶性表达

高士争  张玉静  刘松财  郝军元  
【摘要】:正将抗脂肪细胞40.0kDa特异胰蛋白scFv基因与pCANTAB5E载体连接构建的噬菌体载体转入E.coliTG1细胞,通过M13KO7辅助噬菌体挽救构建了噬菌体抗体库,转化效率为92.76%,库容量为2.69×10~7;用纯化的抗原经3轮筛选之后再用ELISA筛选,抗体库的阳性率为83.33%;将阳性最高的特异性重组噬菌体感染E.coliHV2151细胞表达可溶性噬菌体抗体,经SDS-PAGE、ELISA和Western-blot鉴定,表达的抗体分子量为32.0kDa,与scFv抗体片段地理论分子量相符,可溶性抗体

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