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中国IBV地方分离株的分型研究

王泽霖  王宪文  菅复春  席瑞珍  姚惠霞  
【摘要】:将来自我国5个省的16株IBV地方分离株分别与6株标准血清型毒株(M41Holte、Arka、Conn、Gray、T)在气管环上进行交叉中和试验。结果显示,在我国存在着众多的血清型及其变异株,其中M类有江苏Y、云、郑18、9817、118、Am株;Conn类有118株和Joo株;Gray类有肾-20、E、9801株;Holte类有广30、张IBV、9801株;T类有云、9801株;Ark类有广35、云、郑18;宜类有Am、9801;另有与上述各标准株均无反应的广32株。在16株地方株中.M类呼吸型IBV最多.有6株.占37.5%.仍为当前IBV流行的主要血清型。河南分离的肾变型宜毒株与除Holte株以外的其余标准株均由不同程度的交叉.但与Ark株相关性最大.为25%。将5株标准株和6株地方分离株的0.6kb扩增产物.用三种限制性内切酶Alu I、Taq I和Afa I进行酶切.RFLP分析可将标准株分为如下三种模型①M41模式:Alu I酶切、Taq I酶切均有特异的条带(Afa I酶切均为阳性);②Ark株、G株、C株模式:Alu I酶切阳性而Taq I酶切阴性;③T株模式:Alu I酶切阴性而Taq I酶切阳性。可将各地方株分为两种模式①M41模式有:广32株、J7株、张IBV株、Am株②Ark株、G株、C株模式有138株、宜株;将地方株宜株的0.6kb扩增片段进行测序并与标准株Ark株、G株、C株、Holte株和M41株的相应序列进行分析比较,核苷酸、氮基酸同源性的分析显示.宜毒株与同一酶切类型的Ark-1529-29株同源性最高,核苷酸同源性为93%,氨基酸同源性为91.6%。推测宜株可能是Ark血清型毒株的变异株。血清学分型与基因分型在宜株定位上的一致性,在地方毒株分类上不完全一致性.表明这两种分型方法既有内在联系。又存在着截然不同的差异。

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