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鸡传染性支气管炎HI抗体的研究

王泽霖  张建武  罗新霞  黄娟  刘志军  
【摘要】:应用(NH4)2SO4盐析法从A型魏氏梭菌培养滤液中粗提卵磷酯酶(PLC)(蛋白含量为2.798mg/ml).与等体积的M41或宜毒株的新鲜尿囊液混合,在37℃水浴作用2小时并不断振荡来制备HI抗原。在HI试验中.该抗原不与AIV H5,AIV H9.NDV.EDS-76,IBD单因子血清和SPF鸡血清.小牛血清、兔血清反应.仅与IBV阳性血清反应.有高度的特异性。通过对25份非免疫鸡血清抗体的测定与攻毒试验.确定了免疫临界线为4log2.HI滴度≥4log2,相当于ELIsA P/N值大于2.1.中和效价大于1:20.攻毒保护5/5;HI滴度4log2.相当于ELISA P/N值小于2.1.中和效价小于1:20.攻毒保护3/9。HI试验与中和试验,ELISA试验有很高的相关性。用建立的HI试验进行了IBV的分型研究,通过与15个不同毒株间的交叉HI试验.表明不同毒株间有广泛交叉,可将10个毒株分为三大群.其中M类呼吸型仍占主要地位(50%).宜毒株类也占一定比例(30%).因此可选用M41+宜或M41+当地毒株来制备IB疫苗。IBV HI试验具有型特异性。初次免疫应用疫苗株同型毒株做抗原.再次免疫交叉反应增大,可采用混合毒株做抗原。用HI试验进行IB的血清流行病学调查,出壳雏鸡母源抗体在5-10天后降至临界值4log2水平。25日龄初免鸡.IB抗体在免疫后21天达到峰值6log2,维持一个月后降至临界值4log2;70日龄进行二免的青年鸡,IB抗体21天后升至峰值10log2,至实验结束时维持3个月无明显下降;成年鸡随鸡龄的增大而抗体滴度升高,维持时间则更长。实践表明用自制IBV HI抗原建立的HI试验简便、快速、准确,可为基层提供一种用于IBV的诊断.免疫效果检测和血清流行病学调查研究的新方法,还可用于IBV分型、疫苗株的选择、免疫程序的制订。

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