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《第四届中国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集》2001年
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鸡γ—干扰素基因的克隆及表达

钱建飞  刘宏梅  凌雯  李银  张则斌  
【摘要】:应用逆转录多聚酶链式反应(RT—PCR)技术,以自行设计合成的一对引物,从ConA激活的SPF鸡外周血淋巴细胞中,扩增出了鸡γ—干扰素(ChIFN—γ)基因。将ChIFN—γ基因插入pMD18—T栽体,构建成pMDChIFN重组质粒,经酶切鉴定和DNA序列测定,表明克隆片段为ChIFN—γ基因。应用DNA重组技术,将ChIFN—γ基因克隆到原核表达质粒pBV220 PRPL启动子下游,构建成pBVChIFN—1重组表达质粒,转化大肠杆菌DH5α,通过温敏诱导表达,在大肠杆菌中成功地表达了ChIFN—γ,其表达水平占全菌总蛋白的9%,经微量细胞病变抑制法测定其生物学活性,重组ChIFN—γ抗水泡性口炎病毒(VSV)的效价达1:32。为ChIFN—γ进一步研究和开发应用奠定了良好的基础。

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1 余兴龙,涂长春,李红卫,陈创夫,李作生,马正海,孙明,殷震;猪瘟病毒E2基因真核表达质粒的构建及基因疫苗的研究[J];中国病毒学;2000年03期
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5 郝敏;玉米与大斑病菌构成的不同互作中基因表达的研究[D];河北农业大学;2006年
6 黄志强;产碱性蛋白酶海洋细菌的筛选及其基因克隆[D];福建农林大学;2006年
7 武鸿;嗜热脂肪地芽孢杆菌脂肪酶基因的克隆、表达及酶学性质研究[D];浙江大学;2007年
8 余国武;腊梅脂转移蛋白基因克隆与功能的初步分析[D];西南大学;2007年
9 赵秀振;蓖麻蚕体液胰凝乳蛋白酶抑制剂调查及其基因克隆[D];中国农业科学院;2007年
10 马维;辣椒疫病抗性相关基因的克隆与分析[D];西北农林科技大学;2007年
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