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《中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编》2003年
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农杆菌介导的蓝猪耳遗传转化体系的建立

齐一伯  徐夙  韩玉珍  
【摘要】:正 蓝猪耳(Torenia fourineri)为玄参科蓝猪耳属植物,一年生草本,原产于热带或亚热带,是一种观赏花卉。在蓝猪耳胚囊发育的四核期,其胚囊从珠扎端伸出,到胚囊发育成熟时,胚囊中的助细胞、卵细胞和大部分的中央细胞都暴露于珠被组织之外,是研究被子植物受精生物学极好的模式植物。随着分子生物学的进步,应用植物基因工程技术已经成为植物发育生物学研究的重要手段。我们用农杆菌介导的叶盘法,成功地将外源基因导入蓝猪耳基因中,获得了较为成熟的蓝猪耳遗传转化方法并摸索出转基因植株的再生条件。使运用转基因手段进行蓝猪耳受精过程的研究成为可能。蓝猪耳植株生长在25℃,16小时光期,光强1500~2000 1x的温室中。农杆菌菌株为LBA4404,转化载体为PBI121-GFP-mTn(由袁明教授实验室提供),载体序列总长度为12kb,T-DNA区结构为GFP-mTn嵌合基因。取温室生长的植株叶片。按常规方法消毒后,用打孔器打成叶盘,于农杆菌菌液中(加入终浓度为100μM的AS)浸泡8分钟,在农杆菌菌液浸染的过程中,菌液中加入AS作常重要,如仅在共培养培养基中加入AS,转化效率会显著降低。滤纸吸干后,外植

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