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拟南芥一个影响叶形发育和抗病突变体的图位克隆与功能鉴定

杨巍  崔华  董冉  丁新华  储昭辉  
【摘要】:近年来的研究表明,参与植物脂质代谢过程中的许多酶同时也参与了植物抗病信号的调控。我们通过对野生型COL进行EMS处理,筛选到了一个突变体,其表型为叶片窄小且卷曲,成熟叶片上出现点状坏死斑。进一步研究发现,突变体组成型表达抗病蛋白PR1,叶片中H_2O_2含量升高,耐受干旱胁迫,且对铜离子表现出一定的敏感性。对突变体接种丁香假单胞杆菌Pst.DC3000发现突变体表现出抗病性提高。通过对叶片激素含量测定发现,突变体的IAA,JA,ABA的含量均有大幅提高,而SA含量则略有降低。我们通过图位克隆的方法克隆了该基因,通过序列比对,发现其编码一个硬脂酰-ACP去饱和酶。有趣的是,我们在基因的编码区同时发现了两个G→A的点突变。功能互补实验证实该基因的双突变确实引起上述表型。为探明两个点突变各自的功能,我们通过融合PCR的方法构建了该基因单突变的载体,转化及后续的功能研究正在进行中。

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