收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

CMV卫星RNA人工突变体在烟草上复制和积累的研究

朱丽萍  廖乾生  吴鹏  陈集双  
【摘要】:卫星 RNA(satellite RNA,satRNA)是一类伴随植物病毒侵染、依赖于后者进行复制、包被和运输的亚病毒小 RNA 分子。我们筛选获得一株能够伴随辅助病毒 CMV-Fny 复制,但其5′端比大部分 CMV-satRNA 缺少2个碱基的卫星 RNA(2msat)。本研究通过 PCR 技术在其5′端 (5′-GUUGUUUG……-3′)进行“碱基加/减”,获得了一系列人工构建的2m 衍生突变体: 2mF1((2m-U,5′-GUGUUUG……-3′)、2mF2(2m-UU,5′-GGUUUG……-3′)、2mF3(2m-UUG, 5′-GUUUG……-3′)、2mF4(2m+U,5′-GUUUGUUUG……-3′)、2mF5(2m+UU,5′-GUUUUGUUUG……-3′)、 2mF6(2m-GUUG,5′-UUUG……-3′)和2mF7(2m-GUUGU,5′-UUG……-3′)。2msat 及其突变体的体外转录产物分别与 CMV-Fny 病毒 RNA 混合接种普通烟(Mcotiana tabaccum),进行假重组分析。接种3d,RT-PCR 检测接种叶上 satRNA 复制的结果表明:2msat 的5′端缺失1~3个碱基,或者在5′端的第一个 G 后面添加 U 或 UU,其相应突变体均可依赖 CMV-Fny 在烟草中进行复制;而一旦5′端的4个碱基(GUUG)被缺失,2msat 则不能复制。因此,2msat 的5′端至少必须具有 GUUU 元件,才能在烟草中进行复制。接种7d、14d 和21d,RT-PCR 检测 satRNA 在系统叶中复制的结果显示:接种7d,2msat 及其突变体均存在于寄主组织中;接种14d,系统叶中检测到2mF3sat、2mF4sat 和2mF5sat,而不能检测到2mF1sat 和2mF2sat;接种21d,系统叶中只能检测到2mF4sat 和2mF5sat。不同接种时间,用 Real-time RT-PCR 分析接种叶和系统叶组织中卫星 RNA 的相对含量,结果如下,接种3d,2msat、2mF1sat、2mF2sat、2mF3sat、2mF4sat 和 2mF5sat 在接种叶相对含量之比为1:1.05:1.93:1.59:1.98:1.57;接种5d,其相对含量依次为1:0.91:1.26:0.85:1.17:1.08,以上结果说明在接种叶中卫星 RNA5′端结构改变对2msat 的积累量影响没有明显的差异。在系统叶中,2msat 及其突变体的含量为2mF4sat>2mF5sat> 2mF3sat>2msat>2mF1sat>2mF2sat,并且在3个检测时间,2mF4sat 的含量均远高于其它突变体。上述结果表明:5′端结构不仅直接与 CMV 卫星 RNA 复制相关,还可能影响卫星 RNA 在寄主中的积累量。

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 程宁辉,濮祖芹,方中达;引起番茄坏死的黄瓜花叶病毒(CMV)[J];江苏农业学报;1993年04期
2 秦云霞,曾华金,刘志昕,田娥;黄瓜花叶病毒CP基因原核表达及抗血清的制备[J];中国生物工程杂志;2004年08期
3 魏颖颖,王凤龙,钱玉梅,陈德鑫;烟草和黄瓜花叶病毒互作中过氧化氢酶的动态变化[J];植物病理学报;2005年04期
4 魏颖颖,王凤龙,钱玉梅,陈德鑫;烟草与黄瓜花叶病毒互作中过氧化氢酶活性的变化[J];烟草科技;2005年10期
5 黄丽华;湖南省油菜病毒病毒源类型初步鉴定[J];湖南农业大学学报(自然科学版);1984年04期
6 谷登丰,伊米提,陆家海,郭庆元;应用斑点酶联免疫吸附试验检测黄瓜花叶病毒[J];新疆农业科学;1987年01期
7 刘焕庭,朱汉城,王清和;珊瑚豆花叶病病原病毒鉴定[J];山东农业大学学报(自然科学版);1987年03期
8 蔡文启;王荣;覃秉益;马顺福;田波;张成良;陈京;季良;;电融合产生黄瓜花叶病毒的单克隆抗体[J];微生物学报;1989年06期
9 V.R.Mali ,S.B.Rajegore ,潘一山;印度香蕉感染黄瓜花叶病毒发生情况[J];福建热作科技;1990年03期
10 朱汉城,刘焕庭,严敦余,郭兴启,刘学春;红麻花叶病病原病毒鉴定[J];山东农业大学学报(自然科学版);1992年02期
11 程宁辉,杨金水,濮祖芹,方中达,方荣祥;宁沪杭地区黄瓜花叶病毒(CMV)株系群划分的初步研究[J];病毒学报;1997年02期
12 徐平东,谢联辉;黄瓜花叶病毒亚组研究进展[J];福建农业大学学报;1998年01期
13 明艳林;侵染大丽花的黄瓜花叶病毒分离物的鉴定[J];福建农业学报;2004年03期
14 黎微;孔宝华;陈海如;白伟;;云南主要地区辣椒分离的黄瓜花叶病毒的亚组鉴定[J];云南农业大学学报;2008年02期
15 薛小平;王茂胜;陈懿;潘文杰;李继新;;瑞香狼毒提取液防治烟草黄瓜花叶病药效试验[J];安徽农业科学;2008年09期
16 刘瑞娟;任宗艳;邹积田;;双椒病毒病的发生及综合防治[J];内蒙古农业科技;2008年03期
17 大木理,钱浚;利用血清反应直接负染色法诊断黄瓜花叶病毒[J];新疆农业科学;1982年01期
18 夏俊强;王清和;严敦余;吴健华;陈作义;;引起芹菜花叶的一个病毒分离物[J];上海农业学报;1986年01期
19 严敦余;刘焕庭;张勇;刘学春;;芫荽花叶病病原病毒鉴定[J];云南农业大学学报;1992年04期
20 周益军,侯庆树,杨代凤;十省(区)大豆病毒毒源分析[J];大豆科学;1995年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 廖乾生;曾蓉;王海燕;朱丽萍;陈集双;;卫星RNA对黄瓜花叶病毒在番茄中积累量的影响[A];中国植物病理学会2007年学术年会论文集[C];2007年
2 朱丽萍;廖乾生;吴鹏;陈集双;;CMV卫星RNA人工突变体在烟草上复制和积累的研究[A];中国植物病理学会2007年学术年会论文集[C];2007年
3 陈集双;严师节;廖乾生;;黄瓜花叶病毒2b基因及其与卫星RNA互作研究[A];中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会论文摘要集[C];2007年
4 刘年娟;初昭嶠;李祿先;;油菜花叶病毒6号提純的初步考察[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编(生物化学)[C];1964年
5 席德慧;向本春;刘升学;朱水芳;张成良;张作芳;;黄瓜花叶病毒异常分离物自然感染甜菜的首次报道[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(上册)[C];1999年
6 李华平;周国辉;徐春香;饶雪琴;;黄瓜花叶病毒衣壳蛋白基因转化香蕉研究[A];中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会论文摘要集[C];2002年
7 谈珺;陈红运;高必达;朱水芳;;黄瓜花叶病毒M株系RNAs 1,2和3序列测定及cDNA克隆的构建[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
8 饶雪琴;张曙光;高乔婉;;香蕉试管苗中黄瓜花叶病毒的检出[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
9 晏立英;许泽永;Marcel Prins;陈坤荣;;黄瓜花叶病毒花生株系CA的全序列分析[A];湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2004年
10 郑国华;明艳林;吴琦;苏勇波;;侵染蝴蝶兰黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因序列的克隆与分析[A];中国植物病理学会2010年学术年会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 温瑞;植物抗病毒基因工程研究 Ⅰ黄瓜花叶病毒复制酶基因表达载体构建和遗传转化 Ⅱ导入病毒基因的转基因植物释放的风险评估[D];浙江大学;2001年
2 刘朝辉;黄瓜花叶病毒运动蛋白与微丝作用关系及胞间连丝通透性调节机制的研究[D];中国农业大学;2005年
3 何煜波;三叶半夏病毒病和细菌病的鉴定、检测和侵染特性及脱毒组培研究[D];湖南农业大学;2006年
4 蒙姣荣;番茄RNA病毒寄主因子基因ToTOM3的克隆与功能鉴定[D];华南农业大学;2005年
5 于翠;番茄花叶病毒(ToMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)单克隆抗体制备及ToMV在烟草上致病分子机理研究[D];浙江大学;2004年
6 郎秋蕾;番茄—黄瓜花叶病毒互作分子机制研究[D];浙江大学;2007年
7 廖乾生;黄瓜花叶病毒2b基因及其与卫星RNA互作研究[D];浙江大学;2007年
8 冯俊丽;黄瓜花叶病毒基因组表达与寄主microRNA的相关性研究[D];浙江大学;2009年
9 牛颜冰;烟草抗病毒基因工程研究[D];浙江大学;2003年
10 胡琼;dsRNA介导的烟草和番茄抗病毒基因工程研究[D];浙江大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张瑜;新疆加工番茄抗黄瓜花叶病毒转基因技术的研究[D];石河子大学;2010年
2 曾华金;CMV-CP基因高效表达与抗血清的制备[D];华南热带农业大学;2003年
3 陈颖;番茄抗黄瓜花叶病毒病遗传转化的研究[D];东北师范大学;2002年
4 周辉;南瓜抗黄瓜花叶病毒(CMV)基因的RAPD分子标记筛选[D];新疆农业大学;2005年
5 马丽娜;烟蚜与寄主、烟草花叶病毒相互作用的研究[D];西南大学;2006年
6 李志勇;辣椒轻斑驳病毒和黄瓜花叶病毒分子鉴定与检测技术[D];河北农业大学;2005年
7 范静苑;烟草黄瓜花叶病毒病抗性遗传分析及其分子标记[D];中国农业科学院;2009年
8 刘媛媛;黄瓜花叶病毒和花生斑驳病毒分子变异分析[D];山东农业大学;2009年
9 张剑锋;CMV 2b蛋白的原核表达纯化及融合策略增强抑制子活性初探[D];吉林大学;2006年
10 贾慧;基因芯片技术在百合病毒检测中的应用[D];河北农业大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 白云;黄瓜花叶病毒病[N];河南科技报;2003年
2 山东省兖州市农业局 宋庆军;兖州羊角椒[N];江苏农业科技报;2002年
3 眉县植保植检站 王民强;谨防烟草病毒病[N];陕西科技报;2001年
4 吴士平;蔬菜与瓜类病毒病防治[N];中华合作时报;2003年
5 广东省科技厅农村处 黄江康 中国科学院华南植物研究所 王亚琴;我国转基因植物研究进展情况[N];广东科技报;2002年
6 张夏讯;燕子衔泥写春意[N];科技日报;2002年
7 孙天麟;栽培西红柿别施摧熟剂[N];山西科技报;2003年
8 东光县农林局 孙学增;为青椒病害开药方[N];河北科技报;2004年
9 符号;我国育出抗病毒转基因西瓜株系[N];农民日报;2001年
10 于文;如何防治棚室番茄病毒病[N];农民日报;2002年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978