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《绿色生态可持续发展与植物保护——中国植物保护学会第十二次全国会员代表大会暨学术年会论文集》2017年
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芽孢杆菌PRO-25遗传转化体系的建立

王娜  冀志蕊  徐成楠  迟福梅  周宗山  
【摘要】:芽孢杆菌(Bacillus spp.)是一类棒杆状,能形成内生芽孢的革兰氏阳性细菌,在自然界中广泛存在。芽孢杆菌具有较强的适应性和抗逆性,能够分泌抑菌物质防治多种植物病害。PRO-25是本课题组从黄瓜老茎中分离获得的一株芽孢杆菌,室内和田间应用结果显示,其能够在苹果枝条上定殖,防治苹果树腐烂病。本研究旨在建立和优化芽孢杆菌的遗传转化体系,为菌株的工程改良和提升应用潜力奠定基础。本实验采用自然转化法,将绿色荧光质粒PXⅠ转入PRO-25细胞内,得到转化子PRO-25-PXⅠ,挑取菌落,在共聚焦显微镜下观察有绿色荧光。转化体系稳定,转化效率高达380CFU/μg DNA。将携带荧光质粒的转化子PRO-25-PXⅠ、野生型菌株PRO-25分别与葡萄灰霉菌对峙培养,两者的抑菌圈大小基本相等,对灰霉菌达到同样的抑菌效果。本研究为PRO-25的后续分子调控机制研究提供了重要基础。

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