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《植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集》2011年
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小菜蛾嗅觉膜原蛋白SNMP1基因的克隆表达

张志春  张谷丰  罗光华  方继朝  
【摘要】:研究表明,昆虫的嗅觉在处理来自环境的化学信号过程中起着非常重要的作用,从而使昆虫能够觅食,寻找配偶、产卵场所、寄主和猎物,及发现捕食者等。昆虫的气味识别过程非常复杂,有多种蛋白参与,迄今为止,昆虫的嗅觉识别机制研究取得了一些可喜的进展,但是,对整个嗅觉信号传导途径了解得非常少。对昆虫嗅觉机理的深入研究,是探索农业害虫专一性防治的基础,并有利于探明昆虫内在的行为机制,解释昆虫各种生命行为与寄主植物的协同进化机制,同时,还可以为研发与环境兼容性好,对天敌无害的高效害虫引诱剂和趋避剂提供依据。感觉神经元膜蛋白基因(sensory neuron membraneprotein,SNMP)是属于人类基因中CD36基因家族的一类,是CD36家族中唯一在神经元中发现的基因。SNMPs是位于嗅觉受体神经元上的嗅觉特异性蛋白,具有2个跨膜区域,分别位于靠近C2端和N2端,以及一个大的胞外环。近些年的诸多研究表明,SNMPs在气味鉴别中可能扮演着重要的角色。本文利用RT-PCR和RACE技术克隆到小菜蛾感觉神经元膜蛋白PxyISNMP1基因,其核苷酸序列全长1 569bp,编码523个氨基酸残基,估测其成熟蛋白分子量为59.06kDa,等电点为7.57,和其他鳞翅目昆虫SNMP的氨基酸序列比对同源性较高,达70%以上,预测发现序列中有2个跨膜区,具有昆虫感觉神经元膜蛋白(SNMP)的典型特征。将PxyISNMP1编码区克隆到表达载体pET 28a中,成功构建了小菜蛾snmp1基因的原核表达载体,导人大肠杆菌BL21(DE3)细胞中,经过IPTG诱导以及SDS-PAGE分析,结果表明,小菜蛾SNMP基因可在大肠杆菌中转录,并能正常表达。
【作者单位】:江苏省农业科学院植物保护研究所
【基金】:国家自然科学基金(31000979)
【分类号】:S433

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