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《多彩菌物 美丽中国——中国菌物学会2019年学术年会论文摘要》2019年
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EGFR/Grb2参与rasfonin诱导的自噬和程序性坏死间的转换

侯卜琳  刘玲  刘述春  姜学军  
【摘要】:按照Clarke形态学分类法,目前将细胞程序性死亡(programmed cell death, PCD)分为三种类型,即I型的细胞凋亡、II型的自噬性细胞死亡和III型的程序性坏死。大量研究表明,自噬与凋亡间存在着密切的联系;相比较自噬和凋亡关系的研究,目前有关自噬与程序性坏死间关联性的报道较少。Rasfonin是从真菌Doratomyces sp.的发酵提取物中分离得到的具有显著肿瘤抑制活性的化合物。之前的研究我们发现,其可以诱导肾癌细胞的自噬;但是,高浓度的该化合物长时间处理细胞却出现了抑制自噬的发生,其具体的机制不明。本研究中,我们利用免疫印迹、免疫沉淀、流式细胞计数、电镜、荧光显微镜等手段研究了rasfonin抑制细胞自噬的具体机制。结果表明,rasfonin抑制自噬与其诱导的细胞程序性坏死相关,而表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)以及其下游插头蛋白Grb2 (growth factor receptor-bound protein 2)在其中发挥关键作用。免疫沉淀显示,无论是EGFR还是Grb2均和参与程序性坏死的蛋白RIP1 (receptor-interacting protein)、p62 (一种多功能蛋白,经常用于作为自噬的底物)以及AIF(apoptosis inducing factor,凋亡诱导因子)存在相互作用。Rasfonin能通过ROS (reactive oxygen species)的产生引起EGFR的磷酸化并改变其下游信号转导。用小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA)敲降EGFR、Grb2、p62和RIP1能恢复该化合物诱导的自噬;而在敲降AIF的细胞中,只有坏死性凋亡以及细胞焦亡抑制剂存在的情况下,自噬才能恢复。上述结果表明,rasfonin不仅能调节细胞自噬和凋亡,而且,也会诱导不同类型的程序性坏死;而EGFR/Grb2、p62、RIP1以及AIF参与了rasfonin引起的自噬与程序性坏死之间的转换。上述结果的取得使我们能更好地认识自噬与程序性坏死的调节机制。

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