灵芝酸抗肿瘤细胞生长的作用机制及乙酰化构效关系

【摘要】：灵芝酸(Ganoderic acid,GA)是药用真菌灵芝的主要活性物质,具有良好的抗肿瘤活性,但其作用机理及构效关系尚未报道。本研究对分离自灵芝菌中的GA进行去乙酰化修饰,获得四种类似结构的化合物,GA-T、GA-Mk,GA-T1和GA-T2,其母环上分别有3个、2个、2个和1个乙酰基。四种GA类化合物对宫颈癌HeLa细胞显示出差异的细胞毒性,并诱导其凋亡。进一步研究提示,四种GA均可抑制HeLa细胞的抗氧化应激保护系统,并诱导活性氧(ROS)的积累,而过高的ROS水平破坏线粒体膜电位,经由caspase依赖的线粒体途径引起HeLa细胞凋亡。外源抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)、过氧化氢酶(CAT)和二苯基氯化碘(DPI)的添加,GA诱导的细胞毒性、ROS积累和caspase-3酶活均显著降低。因此,GA类化合物的抗肿瘤细胞生长的作用机制涉及经由ROS介导的caspase依赖线粒体凋亡途径。另外,GA的高度乙酰化可显著提高其诱导肿瘤细胞ROS积累水平,从而增加其细胞毒性和凋亡诱导能力,这四种GA化合物诱导ROS积累、细胞毒性及凋亡的能力依次为GA-TGA-Mk≈GA-T1GA-T2。