发酵产氢细菌产氢基因及其克隆策略

【摘要】：利用高浓度有机废水生物制氢是环境工程重要的研究领域。本文对发酵产氢细菌产氢代谢的关键酶——氢化酶及其控制基因的研究现状进行了综述。氢化酶可以分为NiFe氢化酶、Fe氢化酶及无金属氢化酶。其控制基因的研究相当广泛。进行氢化酶控制基因的克隆的首选办法是进行相关物种氢化酶基因的网上查询,并设计引物克隆基因;其次是建立基因组文库或cDNA文库,利用核酸杂交技术或功能克隆技术进行氢化酶基因的克隆;第三,分离纯化氢化酶蛋白并进行氨基酸测序,根据氨基酸顺序设计引物进行目的基因的克隆,或免疫抗体分离克隆目的基因。通过氢化酶及其控制基因的克隆研究,可以构建高效产氢工程菌,从而使进一步提高发酵产氢系统的产氢能力,奠定菌种种质基础。